Acido graso desaturasas del tipo metilo-terminal de Leishmania major

ALLOATTI, ANDRÉS; UTTARO, ANTONIO D.

Mendoza

Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2005

Sociedad Argentina de Protozoología

La síntesis de ácidos grasos en tripanosomátidos es un aspecto poco explorado de su metabolismo. Dichos organismos presentan gran cantidad y diversidad de  ácidos grasos poli-insaturados. Del estudio de la secuencia del genoma de Leishmania major, recientemente completado, se han identificado diversos marcos abiertos de lectura que codificarían para desaturasas de ácidos grasos. Dichas enzimas son las encargadas de catalizar la introducción de un doble enlace en la cadena alifática de un ácido graso, a través de una reacción mediada por O2 que requiere un dador de electrones como ferredoxina o citocromo b5. Se han clonado y secuenciado los genes correspondientes a dos de ellas, con alta similitud con desaturasas metilo-terminales (delta 12 y omega 3), y se las ha expresado en el sistema heterólogo eucariota Saccharomyces cerevisiae. Este sistema sólo presenta una desaturasa delta 9, hecho que posibilita el estudio de otras desaturasas con diferente actividad. La complementación de las levaduras con diferentes ácidos grasos usados como sustrato de las desaturasas permitió la caracterización bioquímica respecto a su especificidad por sustrato y su  regioselectividad. Ambos genes comparten una identidad de secuencia proteica de 75% y son 56-58% identicas a la delta 12 desaturasa de T. brucei previamente caracterizada por nuestro laboratorio. Sin embargo la caracterizacion funcional las ha identificado como delta 12 y omega 3 respectivamente. Con estos datos hemos completado la caracterización bioquímica de todas las desaturasas pertenecientes a tripanosomátidos. Varias de estas actividades han mostrado ser esenciales para el protozoo, y no se hayan presentes en el hospedador humano, siendo potenciales dianas para el desarrollo de agentes terapeúticos. Los pocos cambios de aminoácidos entre ambas, permitirá establecer los residuos esenciales que determinan la regioselectividad de cada desaturasa.