Evaluación toxicológica del fluazurón en la maduración nuclear y citoplasmática de ovocitos bovinos

CAMPAGNA, ANABELLA A.; FABRA, MARIANA C.; ANCHORDOQUY, JUAN P.; ANCHORDOQUY, JUAN M.; FARNETANO, NICOLÁS A.; FURNUS, CECILIA C.; NIKOLOFF, NOELIA.

La Plata

Jornada; I JORNADA DE DIVULGACION EN BIOTECNOLOGIA; 2022

Facultad de Ciencias Exactas-UNLP

La maduración in vitro (MIV) es un proceso complejo que incluye tanto procesosnucleares como citoplasmáticos, permitiendo al ovocito ser posteriormente fertilizado.Se ha estudiado que las drogas de uso veterinario afectan los gametos y procesosreproductivos, ocasionando daño genotóxico y citotóxico en diferentes tipos celulares yorganismos. El fluazurón (FLZ) es uno de los antiparasitarios más usados paracontrolar la garrapata que afecta el ganado. Se aplica sobre los animales porpulverización, inyección o vertido sobre la espalda; parte es absorbido por elmetabolismo del animal, y sólo una pequeña fracción llega a la garrapata. El objetivode este trabajo fue evaluar el efecto toxicológico del FLZ durante la MIV de ovocitosbovinos. Para tal fin, se estudió la maduración nuclear con tinción de Hoechst 33342analizando la presencia de vesícula germinal (VG), metafase I (MI), metafase II +corpúsculo polar (MII + CP) y ovocitos degenerados (D); y la maduracióncitoplasmática mediante el estudio de gránulos corticales (GC) con tinción de FITC-PNA analizando su distribución como homogénea (H), transición (T), periférica (P) ydegenerada (D). Se utilizaron ovocitos bovinos provenientes de ovarios de frigorífico.El medio de MIV fue TCM 199 con 10% de suero fetal bovino y hormonas. Lostratamientos consistieron en el agregado de 1% DMSO (control), (50, 75 y 100) µgFLZ/ml. Además, se trabajó con un control positivo de 0,10 µg cicloheximida/ml. Losovocitos fueron madurados durante 24 h a 39°C con 5% de CO 2 . Los datos fueronanalizados mediante una regresión logística utilizando el software GLIMIX (SASInstitute), registrándose diferencias significativas cuando P<0,05. Los resultadosdemostraron que: 1) FLZ disminuyó la tasa de ovocitos MII+CP (P<0,002) eincrementó los ovocitos D respecto al control (P<0,05) con todas las concentracionesensayadas; 2) Los ovocitos P disminuyen con 100 µg FLZ/ml respecto al control(P<0,05). Estos primeros ensayos refuerzan la necesidad de seguir evaluando al FLZcomo tóxico reproductivo.