Identificación Genética de especies

POSIK DM Y GIOVAMBATTISTA G.

, Pergamino, Buenos Aires, Argentina.

Congreso; XXXVI Congreso Argentino de Genética; 2007

SAG

Durante las últimas décadas se ha incrementado la necesidad de desarrollar métodos de identificación especie específica cada vez más precisos y confiables. Por un lado, en los últimos años han aparecido aprensiones con respecto al origen y a la seguridad de los alimentos y por otro, se está llegando a una crisis generalizada en la biodiversidad terrestre producida, en parte, por el inmenso tráfico de especies en peligro de extinción. Debido a esto, la identificación especie específica por medio del análisis de ADN ha surgido como un área de investigación relativamente reciente encaminada a solucionar problemas concretos. Actualmente, se han desarrollado técnicas que permiten extraer ADN de casi cualquier muestra biológica. A partir de éste se amplifican por PCR diferentes regiones principalmente del ADN mitocondrial, pero también genómicas, sobre las que se realizan los análisis de identificación especie específica. Entre los genes mitocondriales más utilizados se encuentran el citocromo b, los RNAs ribosomales 12 S y 16 S y la citocromo oxidasa I. Los genes nucleares incluyen al ARNr 28S, la β actina, el TP53 y el ARNr 5S. Las técnicas de identificación son variadas e incluyen la amplificación por PCR y la posterior digestión con enzimas de restricción (PCR-RFLP), la amplificación al azar de ADN polimórfico (RAPD-PCR), la detección de polimorfismos de conformación de simple cadena a partir de fragmentos de PCR (PCR-SSCP), la utilización de primers específicos y su aplicación en PCRs múltiples, la detección de polimorfismos de nucleótidos simples (SNPs) por medio de la pirosecuenciación o la secuenciación directa de un fragmento de amplificación. En los casos en que se hace necesaria la cuantificación del ADN de una especie particular dentro de una mezcla, se han desarrollado métodos que requieren del uso de la PCR en tiempo real. Estas metodologías han sido aplicadas para la resolución de diferentes problemáticas. Por ejemplo, en nuestro laboratorio se han utilizado para comprobar la adulteración con leche de vaca de quesos que el fabricante declaraba eran elaborados con leche pura de cabra; para demostrar la adulteración de una muestra de orina de un caballo que fue descalificado en una competencia por doping positivo, en donde el análisis permitió demostrar que la muestra no solo no pertenecía al caballo cuestionado, sino que además ni siquiera era de un equino, sino que era orina humana; la identificación de animales secuestrados por tráfico en los que las autoridades de fauna sostenían que eran vicuñas mientras que los propietarios argumentaban que eran llamas o la certificación de que un alimento balanceado está libre de ADN de rumiantes. Si bien las técnicas descriptas fueron creadas originalmente para su uso en el ámbito de la investigación, hoy en día son empleadas en diversas disciplinas relacionadas con la identificación especie específica como por ejemplo la tecnología de alimentos, el área forense y la protección de especies silvestres, permitiéndonos resolver problemas cotidianos impensados al momento del diseño de las mismas.