Desarrollo y optimización de método para aislar retrotransposones en Allium sativum L.

YAÑEZ A, ; GIMENEZ M, ; PAZ, ROSALÍA, ; GARCÍA LAMPASONA S

Bariloche

Congreso; Congreso. XLII Congreso Argentino de Genetica.; 2014

SOCIEDAD ARGENTINA DE GENETICA-SAG

RESUMEN CONGRESO DE GENETICA TECNICA PARA VALIDAR LA EXPRESION DE GENES DE RETROTRANSPOSONES EN ALLIUM SATIVUM.L Los elementos transponibles (ETs) son secuencias discretas de ADN con capacidad de moverse de un sitio a otro dentro del genoma, estos elementos genéticos móviles son componentes universales en plantas, bacterias, hongos y animales; constituyendo hasta el 80% en maíz y otras plantas. Existen dos grupos de ETs: i) Clase I o Retrotransposones que se movilizan a través de un intermediario de RNA y ii) Clase II o Transposones de ADN que carecen de este intermediario. En un trabajo anterior A partir del análisis in silico de secuencias provenientes de fragmentos de ADN de Allium sativun. L, obtenidos a partir de geles de poliacrilamida de MSAP (Methylation-Sensitive Amplified Polymorphism) se logro identificar la presencia de 3 proteinas estructurales de retrotransposones Clase I (Superfamilia Ty3- gipsy) perteneciente al orden LTR. Estas proteínas se identificaron como RNasa H, retrotranscriptasa (RT) e integrasa (INT), estas secuencias presentaron cambios hacia estados hipometilados desde el tiempo 6 a 12 meses de cultivo in vitro. El objetivo de este trabajo fue validar la expresión de los genes de los retrotransposones mediante el diseño y síntesis de cebadores forward secuencia específica y verificar la expresión sobre ADN copia procedente de muestras de ARNm de A. sativum cv Fuego INTA proveniente de cultivo en campo e in vitro. Los resultados revelaron la presencia de fragmentos de diferente longitud, entre 700 ? 1500 pb. Estos productos de amplificación, indicarían que diferentes transposones se estarían expresando activamente en el ARNm