“Identificación de una lipasa en Enterobacter aerogenes asociada a infecciones urinarias”.

ENRIQUE, RAMÓN; BALAGUÉ, CLAUDIA; GARCÍA VÉSCOVI, ELEONORA

Rosario, Santa fe

Otro; XXIII Reunión anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2003

Sociedad de Biología de Rosario

El género bacteriano Enterobacter no es considerado como agente primario como agente primario causal de patologias en humanos, pero estudios epidemiológicos muestran que es un agente etiológico relevante en infecciones nosocomiales. En trabajos previos se llevó a cabo una búsqueda de potenciales factores de patogenicidad en los que, a partir aislamientos clínicos, se identificaron 4 cepas con factores citolíticos. Se verificó que la actividad citolítica de estas cepas no se correlacionó con la actividad hemolítica de la familia RTX, ni tampoco mostró propiedades características de las citolisinas tiol activadas. A su vez, se verificó la actividad citotóxica en leucocitos humanos y ensayos de detección en placa mostraron la producción de una actividad lipasa extracelular en cepas de Enterobacter hemolíticas. En el presente trabajo se planteó la caracterización molecular de una lipasa en Enterobacter aerogenes y su relevancia como factor de virulencia en un modelo de infección in vivo. Se diferenció a esta enzima de las esterasas mediante el uso de sustratos específicos en placa y medios líquidos. Además, la lipasa, presentó inhibición de la actividad ante el agregado de agentes quelantes como EDTA o EGTA, con posterior reactivación al agregarle cationes divalentes como Ca+2 y Mg+2. La enzima presentó máxima actividad a temperaturas entre 37-50 ºC y pH óptimo de 8. El peso molecular estimado mediante geles de proteína y zimogramas fué de 26Kda. Para el ensayo de infección in vivo se utilizaron ratones hembra Balb-c de 60 días los cuales fueron desafiados mediante inoculación intra-uretral con la cepa Enterobacter aerogenes RM66262 uropatógena, positiva para la actividad lipasa; y la cepa Enterobacter cloacae RM61591, no uropatógena, utilizada como control. En base al modelo de infección realizado, se observó que el aumento de la dosis inoculada favorece la colonización de las vias urinarias altas, asi como su persistencia. La cepa mutante, resultó atenuada en la capacidad de colonización de vejiga y ascenso a riñón. En base a estos estudios se concluye que la lipasa descripta en Enterobacter se correlacionaría con lipasas bacterianas prototipo de la familia I.1 descriptas en Pseudomonas aeruginosas. Y que dicha actividad, podría jugar un rol importante como factor de virulencia en las infecciones urinarias.