El ácido retinoico inhibe el crecimiento tumoral y las metástasis mediante la modulación de la quinasa de adhesión focal

CASTRO GUIJARRO AC; VANDERHOEVEN F; MONDACA JM; UZAIR ID; SANCHEZ AM; FLAMINI MI

Mendoza

Congreso; ?1 er. Congreso Interuniversitario I+D+i Mendoza?; 2021

organizado por las Universidades de la Provincia de Mendoza

El cáncer de mama es el de mayor morbilidad en mujeres de todo el mundo y es altamente letal cuando la enfermedad progresa a un estadio avanzado. Esto se debe principalmente a que actualmente no existen enfoques terapéuticos que interfieran con el proceso metastásico. La metástasis es un evento controlado y coordinado que involucra la reorganización del citoesqueleto actínico y la desregulación de la adhesión y migración promoviendo la invasión celular. La quinasa de adhesión focal (FAK) es clave en estos procesos. Es una proteína con actividad quinasa que además funciona como proteína de andamio. Es considerada el regulador central de la motilidad celular ya que se encuentra en una posición única de convergencia de numerosas vías de transducción de señales, como la vía de integrinas y de los receptores tirosin-quinasas, que transmiten señales desde la matriz extracelular hacia el citoesqueleto. La sobreexpresión de FAK se ha demostrado en varios tumores y ha sido asociada a un mal pronóstico para las pacientes. El ácido retinoico (RA) es un derivado de la vitamina A. Sus metabolitos naturales y sintéticos, conocidos como retinoides, son agentes prometedores para el tratamiento del cáncer de mama debido a su actividad antitumoral, producto de su unión a los receptores de RA (RARs). Sin embargo, el uso de RA en el tratamiento de tumores sólidos es limitado, pues numerosos estudios han demostrado efectos controversiales. Por tanto, es necesario dilucidar los mecanismos moleculares que subyacen a la señalización del RA. El objetivo de este estudio fue investigar el rol del RA en la modulación de la migración, el crecimiento y la metástasis de células del cáncer de mama a través de FAK. Para ello, exploramos mediante bioinformática los perfiles de expresión de genes que codifican a RARs (α, β, γ), Src y FAK en diferentes tipos de células de cáncer de mama. Además, examinamos el efecto del RA sobre la adhesión y la motilidad de las células de cáncer de mama mediante western blots, inmunofluorescencia y ensayos de adhesión y migración celular utilizando la línea celular de adenocarcinoma mamario murino LM3. Asimismo, determinamos el rol del RA sobre el crecimiento tumoral y la metástasis inoculando células LM3 en ratones BALB/c. A partir del análisis bioinformático, confirmamos la sobreexpresión de los genes que codifican a RARα, Src y FAK en todas las células de cáncer de mama estudiadas. Demostramos que el RA disminuye la viabilidad, adhesión y la migración celular y que estos eventos de inhibición inducidos por RA son exacerbados cuando se combina con el inhibidor de FAK (FAKi). Evidenciamos además que el RA reduce la expresión de FAK en células LM3. Mediante inmunofluorescencia demostramos que, en las células sin tratar FAK se localiza de forma homogénea y difusa por todo el citoplasma, mientras que el tratamiento con RA desencadena la relocalización de FAK hacia el núcleo. La administración del RA también afecta la organización del citoesqueleto actínico facilitando la visualización de fibras de actina, características de un fenotipo celular estático. Por otro lado, en un ensayo de crecimiento ortotópico de tumor en ratones observamos que, si bien tanto RA como FAKi reducen el crecimiento del tumor, el tratamiento combinado induce una inhibición más fuerte y disminuye la expresión de Ki-67 (marcador de proliferación). Además, la combinación RA+FAKi aumenta la supervivencia de los ratones de manera significativa. En un ensayo de metástasis experimental, demostramos que el RA reduce la diseminación de células tumorales a pulmón. En conclusión, nuestro estudio demuestra que el RA desempeña, in vitro e in vivo, un rol fundamental al interrumpir el crecimiento del tumor mamario y la diseminación metastásica de las células tumorales mediante la modulación de la expresión y localización de FAK. Sugerimos que la sensibilidad y los efectos de las terapias con RA en cáncer de mama podrían incrementarse con la coadministración de FAKi en tumores mamarios.