Accionar inhibitorio de Trastuzumab y Trastuzumab-emtansine sobre proteinas targets de la migración celular en cáncer de mama HER2+

MONDACA JM; CASTRO GUIJARRO AC; UZAIR ID; VANDERHOEVEN, FIORELLA; FLAMINI MI; SANCHEZ AM

Mendoza

Congreso; ?1 er. Congreso Interuniversitario I+D+i Mendoza?; 2021

organizado por las Universidades de la Provincia de Mendoza

El cáncer de mama (CM) es uno de los tipos de cáncer más comunes en mujeres con una alta incidencia y mortalidad debido a la rápida progresión tumoral y la diseminación metastásica. Heregulina (HRG) es un ligando selectivo de los receptores tirosina quinasa HER3 y HER4 que, tras su unión, inducen la activación indirecta del receptor HER2 y regulan eventos celulares claves, como los procesos migratorios e invasivos en CM. La progresión del mismo depende completamente de la capacidad de invadir y hacer metástasis en sitios distantes, siendo la migración celular fundamental en este proceso. HRG promueve una respuesta implicada en el desarrollo de un fenotipo más agresivo en CM HER2+, y junto a la sobreexpresión del receptor HER2 se asocia con un peor pronóstico en pacientes con CM, debido a un aumento en el riesgo de desarrollo de metástasis. Actualmente, se desconocen los mecanismos moleculares a través de los cuales HRG contrarresta la eficacia de terapias específicas anti-HER2, como Trastuzumab (Tz) y Trastuzumab-emtansina (T-DM1). En este trabajo, hemos evaluado la acción molecular de HRG sobre proteínas que participan en la motilidad celular a través de una vía HER2/HER3. Además, hemos determinado la efectividad de Tz y T-DM1 en el control de las proteínas claves involucradas en el movimiento celular en CM. Para el desarrollo del proyecto, utilizamos como modelo experimental, la línea celular de CM humano BT-474 (HER2+). Además, hemos desarrollado ensayos de viabilidad (MTT), migración celular, inmunoblotings, inmunofluorescencia, inmunoprecipitaciones y transfecciones/silenciamientos específicos y el análisis estadístico con test de ANOVA y Tukey-Kramer. Nuestros resultados nos permiten demostrar un novedoso accionar por el cual HRG promueve la reorganización del citoesqueleto de actina, la formación de complejos de adhesión focal, y consecuentemente el proceso de nucleación actínica en las células BT-474, desencadenando el proceso de migración celular. Dicha vía de señalización, impulsada por HRG junto a los receptores HER2/HER3, activan las proteínas Src/FAK/paxilina/Cortactina/N-WASP/Arp2/3 e impulsan la maquinaria