Desarrollo de un nuevo antígeno multiepitope para optimizar el diagnóstico de Chagas

PEVERENGO LUZ; VALERIA GARCIA; BRUNO BELLUZO; ANDREA RACCA; RODELES LUZ; MIGUEL VICCO; LUIS GUGLIOTTA; CLAUDIA LAGIER; VERONICA GONZALEZ; IVÁN MARCIPAR

La Plata

Otro; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoologia

En trabajos previos hemos evaluado diferentes antígenos recombinantes y combinaciones multiepitope, destinadas al diagnóstico de Chagas, utilizando diferentes plataformas de diagnóstico. Hasta el momento, habíamos logrado el mejor desempeño diagnóstico con una proteína constituida por los antígenos FRA y SAPA que denominamos CP1. Dado que la sensibilidad de dicho antígeno es insuficiente para el diagnóstico y no se complementa con ninguna de nuestras proteínas y/o las construcciones recombinantes previas, hemos diseñado una nueva proteína destinada a complementar el desempeño de CP1. Diseñamos un gen sintético constituido por los antígenos TSSAII-MAP-TcD y lo expresamos en el sistema pET28a/ E coli BL21-DE3. Luego, purificamos la proteína con NTA-Ni. Las capacidades diagnósticas de este antígeno (CP3) y del previamente descripto (CP1) se compararon para la determinación de anticuerpos específicos anti-T cruzi en sueros humanos mediante ELISA. A fines de hallar una diferencia mínima del 10% de las áreas debajo de la curva (AUC) entre ambos antígenos (Error alfa=0,05; Error beta=0,20, relación 1:1) el número de muestras requeridas por grupo fue de 15. Se utilizaron 15 sueros positivos y 26 negativos confirmados por ELISA y HAI comerciales. El AUC para CP1 fue de 0.80 (IC95% 0,65-0,90, p=0,001), mientras que la de CP3 fue de 0,99 (IC95% 0,91-0,99, p