Regiones abreviadas de P35 y P22 del Toxoplasma gondii para diagnosticar toxoplasmosis aguda durante el embarazo

COSTA GABRIEL; LEANDRO PERETTI; VALERIA GARCIA; LUZ PEVERENGO; VERONICA GONZALEZ; LUIS GUGLIOTTA; MARIA DALLA FONTANA; CLAUDIA LAGIER; IVÁN MARCIPAR

Santa Fe

Congreso; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2016

Las proteínas P35 y P22 del Toxoplasma gondii son reconocidas por los anticuerpos específicos durante la fase temprana de la infección, por lo que resultan ideales para el control de esta enfermedad en embarazadas. Ambas proteínas han sido estudiadas en trabajos previos para discriminar entre toxoplasmosis aguda y crónica. Sin embargo, los resultados son difícilmente comparables debido a las distintas formas en que dichas proteínas fueron obtenidas, implicando que los determinantes antigénicos expresados en cada caso no sean los mismos. Además, existen diferencias en la tipificación de los paneles de sueros de referencia y sólo en algunos casos estos antígenos se evaluaron en pruebas de avidez. En este trabajo, en primer lugar se predijeron bioinformáticamente las regiones de P35 y P22 con la mayor densidad de epitopes. Para el clonado se empleó el sistema de expresión pET32/BL21DE3, logrando obtener las proteínas rP35a y rP22a de manera soluble. Se evaluó su rendimiento diagnóstico utilizando muestras de suero de embarazadas tipificadas de la siguiente manera: grupo no infectado (NI, IgG negativo), grupo crónico típico (CT, IgG positivo, IgM negativo), grupo presumiblemente agudo (PA, IgG positivo, IgM positivo, avidez de IgG baja) y grupo crónico reciente (CR, IgG positivo, IgM positivo, avidez de IgG alta). Los principales resultados obtenidos mediante ELISA indirecto señalan que con rP35a se obtuvieron mejores resultados que con rP22a para diferenciar los sueros PA de los CR, con áreas bajo la curva ROC (AUC) de 0,911 y 0,818, respectivamente. Sin embargo, su rendimiento para diferenciar los sueros PA respecto a todos los crónicos (típicos y recientes) fue similar, con AUC: 0,915 y 0,907, respectivamente. Para mejorar la diferenciación de los sueros PA de los CR, los antígenos obtenidos se evaluaron mediante ELISA de avidez de IgG. Con ambas proteínas se obtuvieron buenos resultados, con valores de AUC de 0,974 y 0,921, respectivamente. Además, se observó que ambas proteínas se complementan y utilizadas en tándem propician mejores resultados que individualmente. Como conclusión se debe destacar que tanto rP35a como rP22a presentan características que sugieren que podrían reemplazar al lisado del parásito para la detección de toxoplasmosis y para descartar una infección reciente en embarazadas. Nuestra propuesta debe ser validada por un estudio longitudinal y podría conducir a un control fiable de toxoplasmosis durante el embarazo.