PERSONAL DE APOYO
CANTOIA Alejo
congresos y reuniones científicas
Título:
Tiorredoxinas en Entamoeba histolytica: un enfoque interactómico con potencial para profundizar en el estudio del metabolismo
Autor/es:
FRANCO BIROCCO; SERGIO A GUERRERO; ALEJO CANTOIA; GERMÁN L ROSANO2
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; XXXIV REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE PROTOZOOLOGÍA; 2023
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
El parásito intestinal Entamoeba histolytica esel agente causal de la amebiasis. Este protozoousualmente vive y se multiplica en el interiordel intestino humano. Sin embargo, durante lainvasión a tejidos, E. histolytica se encuentraexpuesta a cantidades elevadas de especiesreactivas del oxígeno (ROS) exógenas, lo queresulta altamente tóxico para el patógeno. Seha propuesto a la cisteína como el principal tiolintracelular y uno de los compuestosresponsable del mantenimiento del balanceredox intracelular. En este trabajo,presentamos el estudio de tres tiorredoxinascanónicas, EhTRX8, EhTRX41 y EhTRX6, y unano canónica, EhTRX289. Estas proteínasobtenidas por expresión recombinante enEscherichia coli presentaron estructuramonomérica, y ensayos bioquímicos mostraron que las TRXs son capaces de catalizar lareducción in vitro de disulfuros de baja masamolecular derivados de GSSG y cisteína, siendosólo las canónicas capaces de reducir disulfurosde alta masa molecular como los de laperoxirredoxina de dos cisteínas típicaEhPrx2Cys. El ensayo de pull-down se realizópara las TRXs recombinantes mutantes en lacisteína resolutiva (C/S), que fueroninmovilizadas e incubadas con extractoscelulares del parásito, lo que permitiórecuperar las proteínas interactoras yanalizarlas por LC-MS/MS para obtener losperfiles de interacción proteína-proteína. Estosresultados, evidenciaron patrones deinteracción diferenciales entre las distintasisoformas, mostrando que se encontraríanrelacionadas a proteínas que intervienen endiferentes procesos celulares, como los dedefensa al estrés oxidativo y los detransducción de señales, ampliando lasposibilidades de estudio y profundización delos procesos metabólicos en estemicroorganismo. Para nuestro entender ysaber, esta es la primera interactómicacomparativa de distintas isoformas de TRXs deE. histolytica.Financiado por ANPCyT (PICT2017-2268).