Estudio de RNAseq y proteómica de líneas sobreexpresantes de los dominios GAF y TIP41 de la proteína free R metionina sulfóxido reductasa y la proteína TAP42 de Trypanosoma cruzi Dm28c

GONZALEZ LN; SANZ C; ROBELLO CA; CANTOIA A

La Plata

Congreso; XXXIV REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE PROTOZOOLOGÍA; 2023

Sociedad Argentina de Protozoología

Trypanosoma cruzi es el agente etiológico de laenfermedad de Chagas y a través de un análisisde su genoma, identificamos una secuenciacodificante para la enzima metionina sulfóxidoreductasa libre (fRMSR). En T. cruzi, estaproteína está constituida por un dominio detipo GAF (fRMSRGAF) fusionado al dominioTIP41 (fRMSRTIP41), el cual es homólogo a TIP41de levadura y está involucrado en la regulaciónnegativa de la vía TOR. También se identificóuna secuencia codificante para la proteínaTAP42, cuya función en T. cruzi es desconocida,pero en levaduras forma parte de la regulación positiva de la vía TOR e interactúa con TIP41.Para su estudio se obtuvieron células deepimastigotes de T. cruzi sobreexpresantes deestas proteínas y se caracterizaronfenotípicamente.Realizamos análisis de RNAseq deepimastigotes sobreexpresantes quemostraron que para la línea sobreexpresantede fRMSRGAF se encontraron aproximadamente150 genes con niveles de transcriptomodificado, dentro de los cuales hay diversosgenes que codifican para kinasas. En la líneasobreexpresante de fRMSRTIP41 se encontraron140 genes, de los cuales algunos presentanniveles de transcriptos disminuidos, como porejemplo algunos que codifican para proteínasrelacionadas al sistema de sumoylación,porinas mitocondriales y a histonasdesacetilasas. En cuanto al sobreexpresante deTAP42, los niveles de aproximadamente 100transcriptos se encontraban modificados,donde uno de ellos corresponde a unaminoácido permeasa.En forma paralela, se realizó un estudio deproteómica de la línea de epimastigotessobreexpresantes de TAP42 bajo condicionesbasales de cultivo. Se observó que 60 proteínasse encontraban disminuidas y 46 proteínasaumentadas respecto a la línea control.Algunas de las proteínas cuyo nivel se viomodificado se encuentra relacionadas a la víaTOR, a vías de resistencia a estrés oxidativo y ala síntesis de esterol, entre otras. Financiadopor ANPCyT (PICT2017-2268).