Estrés crónico y su influencia en la homeostasis adrenal en ratas gestantes

BOZZO A; SOÑEZ CA; AVILA RE; ROLANDO A; ROMANINI M C; FLORES BRACAMONTE M C; MUGNAINI MT

Jornada; I Jornada Virtual Nacional e Internacional de Educación e Investigación en Ciencias Morfológicas; 2012

Asociación de Anatomistas de Córdoba

INTRODUCCIÓNLa homeostasis de los tejidos que constituyen a los seres vivos es regulada por los procesos de proliferación y apoptosis celular. El modelo de estrés crónico intermitente por inmovilización durante la gestación puede alterar diversos mecanismos que mantienen la homeostasis del organismo, los cuales son motivo de estudios actuales. En estudios previos se comprobó variaciones significativas en el peso de las glándulas adrenales y en los niveles plasmáticos de PRL, estrógenos y CORT.OBJETIVOS1-Determinar en lotes controles y experimentales las células en proliferación utilizando las técnicas de BrDU y PCNA. 2- Determinar en lotes controles y experimentales las células en apoptosis mediante la técnica de Caspasa 3 activada.MATERIALES Y MÉTODOSSe utilizaron 30 ratas de la cepa Wistar, de 200-300gr de peso corporal. Fueron cicladas, fertilizadas y mantenidas en condiciones controladas de bioterio. A las ratas experimentales (RE) se les aplicó sesiones de estrés por inmovilización (IMO) en planchas desde el 4to día de gestación, por 45 minutos hasta el sacrificio. Las adrenales obtenidos de madres controles (RC) y RE sacrificadas a los 12, 17 y 21 días de gestación fueron fijados con formaldehído bufferado e incluidos en Paraplast- parafina. Se seccionaron en forma seriada y se colocaron en portaobjetos preparados con Vectabond. Para experimentos de proliferación celular con BrDU, las madres se inyectaron vía i.p. con BrDU, 100 mg/kg, 24 horas antes del sacrificio. Se realizaron técnicas inmunocitoquímicaspara la detección en la corteza adrenal de células marcadas con BrDU, PCNA y Caspasa 3 activada. Se utilizaron como primer anticuerpo los anticuerpos policlonales: anti-BrDU, anti-PCNA y anti-caspasa 3 activada, un sistema Vectastain ABC kit universal y se revelaron con DAB. Posteriormente se realizó análisis estereológico y cuantificación de las imágenes de las diferentes zonas de la corteza adrenal de RC y RE. Se aplicó ANOVA de una y tres vías y la distribución de Poisson de un modelo logarítmico lineal con efecto de grupo, tiempo e interacciones. Las diferencias fueron consideradas significativas si p