Efectos ex vivo del Estroncio sobre células progenitoras de médula ósea de ratas diabéticas

LINO A.; FERNANDEZ, JM; MOLINUEVO, S; MCCARTHY, A

Congreso; XXXII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral; 2015

La diabetes mellitus (DM) es una patología crónica caracterizada por hiperglucemia, que afecta al 7% dela población adulta en la Argentina. A largo plazo puede inducir osteopatía diabética, que es una disminuciónen la calidad del material óseo que genera un aumento en la incidencia de fracturas osteoporóticas. Elranelato de estroncio (RSr) es un agente antiosteoporótico que simultáneamente estimula la formación óseaosteoblástica e inhibe la resorción mediada por osteoclastos. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efectode un tratamiento oral con RSr en ratas con o sin DM, sobre el potencial osteogénico de células progenitorasaisladas de la médula ósea de huesos largos (CPMO). Se usaron ratas Wistar macho jóvenes (190-210 g) quese dividieron inicialmente en 2 grupos: no diabéticas (N) y diabéticas (D) por destrucción parcial de la masa decélulas β inducida con inyecciones intraperitoneales de 50 mg/kg nicotinamida y 55 mg/kg estreptozotocina.A los 7 días posinyección, la DM se confirmó por medidas de glucemia e insulinemia, y luego cada grupo sesubdividió en dos subgrupos: sin tratamiento adicional, o tratadas con 625 mg/kg/día de RaSr en el agua debebida, durante 6 semanas. Quedaron definidos así cuatro grupos experimentales (5 animales por grupo): N; N-RS; D; D-RS. Al final de los tratamientos, los animales se sacrificaron por dislocación cervical bajoanestesia, y se obtuvieron CPMO a partir de lavados del canal diafisario medular (húmero y/o fémur) decada una de las ratas. Las células adherentes se cultivaron en medio DMEM-10% FBS con penicilina/estreptomicina a 37 °C en una atmósfera de 5% CO2, hasta confluencia. La monocapa de CPMO de cadaanimal se replaqueó a baja densidad, e incubó por 14-21 días en un medio adicionado de ácido ascórbico yβ-glicerofosfato, con el objeto de inducir su progresión hacia un fenotipo osteoblástico. En todos los casosse determinó la proliferación celular (por el método de MTT), así como el grado de diferenciación osteoblásticomidiendo: actividad específica de fosfatasa alcalina (ALP) con p-nitrofenil-fosfato como sustrato(luego de 14 días de inducción osteogénica); producción de colágeno tipo I (Col-I) con Sirius Red (14 días)y formación de nódulos de mineralización extracelular (Min) con rojo de alizarina (21 días). Respecto delcontrol (grupo N), la inducción de diabetes (grupo D) generó una disminución estadísticamente significativaen la capacidad de proliferación y en el compromiso osteogénico de las CPMO (reducción de 31% en laproliferación, 39% en ALP, 15% en Col-I y 40% en Min). Por otro lado, el tratamiento oral con RSr indujo: a)en los animales no diabéticos (grupo N-RS), un incremento significativo respecto del control en la capacidadde proliferación (33% de aumento) y en la progresión osteoblástica de las CPMO (68% de incremento enALP, 43% en Col-I y 17% en Min) y b) en los animales diabéticos (grupo D-RS), una prevención completa delos efectos antiproliferativos y antiosteogénicos inducidos por la diabetes sobre las CPMO (para todos losparámetros evaluados, no se observaron diferencias con el grupo control). En conclusión, nuestro modelode diabetes mellitus insulinopénica experimental se asocia con una menor capacidad proliferativa de lasCPMO, así como con una disminución en su compromiso osteogénico. Estos efectos deletéreos inducidospor la diabetes se previenen completamente mediante un tratamiento oral con RSr.