Participación de los inhibidores de quinasas dependientes de ciclinas de la familia CIP/KIP en la respuesta de células madre de gliomas derivadas de pacientes frente a tratamientos pro-apoptóticos

OLIVIA MORRIS HANON; MARÍA E. SCASSA; VANESA GOTTIFREDI; SABRINA MANSILLA; VERÓNICA ALEJANDRA FURMENTO; DAMIAN D. FERNANDEZ ESPINOSA; HORACIO MARTINETTO; GUSTAVO E. SEVLEVER; GUILLERMO A. VIDELA RICHARDSON

Simposio; Simposio Internacional Programa RAICES Red de Científicos Argentinos en el Noreste de EEUU. "Ganando la guerra contra el cáncer"; 2016

Los gliomas de alto grado son altamenteagresivos e invasivos. En su progresión producen gran daño neurológico y seincluyen entre los tumores más mortales que existen. Actualmente se propone quelos gliomas de alto grado son generados a partir de células madre tumorales(CMT), las cuales corresponden a una subpoblación minoritaria capaz de generary propagar tumores al ser inyectadas en ratones inmunodeficientes. El cultivode CMT derivadas de pacientes ofrece la posibilidad de realizar investigacionestraslacionales que contribuyan al desarrollo de terapias personalizadas. Elobjetivo de este trabajo consiste en evaluar la participación de losinhibidores de quinasas dependientes de ciclinas pertenecientes a la familiaCIP/KIP (p21Cip1, p27Kip1 y p57Kip2) enla respuesta celular de CMT derivadas de pacientes con gliomas de alto grado frentea tratamientos que inducen apoptosis. Para ello utilizamos 5 líneas de CMT quehan sido establecidas y caracterizadas previamente en nuestro laboratorio. Realizandoensayos de viabilidad y de apoptosis pudimos observar que las distintas líneascelulares exhiben diferentes grados de  sensibilidad frente a condiciones de hambreadoy a tratamientos con camptotecina. Mediante técnicas de RT-PCR en tiempo real determinamosque estos tratamientos producen cambios en los niveles de expresión de los ARNmde los CIP/KIPs. Además, utilizando técnicas de inmunofluorescencia observamosque el tratamiento con camptotecina promueve la acumulación nuclear de p21Cip1y de p27Kip1, sugiriendo la participación de estas proteínas en larespuesta al daño del ADN. Notablemente, el silenciamiento transiente de p21Cip1durante el tratamiento con camptotecina condujo a un aumento en la muertecelular en una de las líneas empleadas, mientras que en otra, dichosilenciamiento no produjo cambios en la viabilidad celular. Estos resultados sugierenque los miembros de la familia CIP/KIP podrían participar en el fenómeno deresistencia tumoral en gliomas de alto grado.