Estudio de los efectos inducidos por el fragmento del péptido beta-amiloide 25-35 en progenitores neuronales derivados de células madre embrionarias humanas

VERÓNICA ALEJANDRA FURMENTO; MARÍA SOLEDAD RODRIGUEZ VARELA; GUILLERMO A. VIDELA RICHARDSON; NICOLAS A. DIMOPOULOS; LEONARDO ROMORINI; MARÍA E. SCASSA; GUSTAVO E. SEVLEVER

Congreso; LX Reunión Anual. Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

La enfermedad de Alzheimer es unproceso neurodegenerativo del sistema nervioso central que provoca deterioro delas funciones cognitivas. Su base patogénica se asocia a la formación masiva deagregados proteicos como las placas seniles cuyo principal componente es unpéptido hidrofóbico de 39-43 aminoácidos (ß- amiloide, ßA), y los ovillosneurofibrilares. El cerebro adulto conserva la capacidad de generar nuevasneuronas a partir de células madre/progenitores neuronales (PN) que se integrana las redes preexistentes en un proceso conocido como ?neurogénesis?. Sinembargo, estos PN no constituyen una fuente de fácil accesibilidad. Por esto, lageneración de PN a partir de células madre embrionarias humanas (CMEh) permitecontar con una valiosa herramienta para dilucidar los mecanismos que conllevana la neurodegeneración. Con el objetivo de estudiar los efectos desencadenadospor el fragmento del péptido ß-amiloide 25-35 (ßA25-35), generamos PN a partirde la diferenciación dirigida de la línea de CMEh, WA-09. Los PN secaracterizaron fenotípicamente mediante FACS e inmunofluorescencia (CD133+ ,Nestina+ , Neurofilamento liviano+ y Doblecortina+ ) y además, se diferenciarona neuronas Tuj1+ , Neurofilamento liviano+ , MAP2+ y MAP5+ . Mediante ensayosde XTT/PMS encontramos que 40 μM de ßA25-35 produjo una disminución del 20% (p<0.05 ,n=3) tratamiento en la viabilidad de los PN luego de 6 días detratamiento.. Asimismo, los PN incubados en las mismas condiciones experimentalesmostraron un mayor porcentaje de núcleos picnóticos y un aumento del 30% (pAnálisispreliminares de RT-qPCR no revelaron diferencias significativas entre losniveles de expresión de los transcriptos de los reguladores de apoptosis Bcl-2,Bcl-xL, Bcl-w, Mcl-1, Puma, Bax y Bim luego de 6 días de incubación conßA25-35. Estos resultados sugieren que el péptido ßA25- 35 ejercería unpotencial efecto neurotóxico en los PN.