METFORMINA EN COMBINACION CON 2-DESOXIGLUCOSA COMO ESTRATEGIA TERAPEUTICA EN UN MODELO CELULAR DE CARCINOMA MAMARIO FELINO

ARBE; FONDELLO ; AGNETTI ; TELLADO ; ALVAREZ ; GLIKIN ; FINOCCHIARO ; VILLAVERDE

Buenos Aires

Simposio; Simposio internacional programa raices - MINCYT; 2016

MINCYT

La glucólisis es la principal vía de obtención de energía en la mayoría de las células tumorales. Su interrupción o modulación resulta una interesante estrategia terapéutica. Previamente, describimos el efecto de metformina (MET, hipoglucemiante oral, bloqueante de FOX) sola o combinada con 2-desoxiglucosa (2DG, inhibidor de la HK) en líneas celulares de carcinoma mamario felino (CMF) observando una menor sensibilidad en la variante triple negativa (RE-, RP- y HER2-), AlRATN, comparado con AlRB, también negativa para los receptores hormonales pero positiva para HER2. En el presente trabajo nos propusimos estudiar los mecanismos y las características celulares que promueven esta respuesta diferencial. A tal fin, AlRB y AlRATN fueron sembradas como monocapas y tratadas por 48 h con MET (1 mM), 2DG (0,5 mM) o la combinación de ambos moduladores (MET/2DG). Entre los principales mecanismos involucrados en la efectividad de MET/2DG encontramos un incremento en la autofagia (aumento vesículas positivas para naranja de acridina, citometría de flujo) y en los oxidantes intracelulares (mayor oxidación de DCF, citometria de flujo). Además, MET/2DG inhibió por completo la capacidad de generar colonias en AlRATN (ensayo clonogénico). Mientras que MET como monodroga (pero no MET/2DG) aumenta la permeabilidad de la membrana plasmática (incorporación del ioduro de propidio, citometría de flujo) y los eventos apoptóticos/necróticos (doble tinción con naranja de acridina y bromuro de etidio, microscopia de fluorescencia). Por otro lado, encontramos un mayor consumo de glucosa y una mayor producción de lactato basal (utilizando Kits comerciales, Weiner lab) en los sobrenadantes celulares de AlRATN comparado con AlRB. Además, AlRATN presentó una menor sensibilidad en la inhibición de la vía de las pentosas y una menor disponibilidad de reservas de glucógeno. Estos resultados sugieren que la menor respuesta de la variante triple negativa AlRATN podría deberse en parte a una mayor activación metabólica comparada con AlRB.