Relationship between pentose phosphate pathway activity and porcine oocyte in vitro maturation

EUGENIA FERRETTI; GABRIEL MARTIN ALVAREZ; GABRIEL CARLOS DALVIT; PABLO DANIEL CETICA

Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires

Jornada; II Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; 2010

Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires

La glucosa consumida por los complejos ovocito-cumulus (COCs) murinos, bovinos y porcinos sería destinada principalmente a la vía glucolítica. Sin embargo, la glucosa puede ser oxidada alternativamente en la vía de las pentosas fosfato, la cual está implicada en la regulación del estado redox intracelular, producción de pentosas fosfato y generación de NADPH para síntesis reductivas. La actividad de esta vía metabólica podría estar vinculada a la capacidad de maduración del ovocito. El objetivo del presente trabajo fue establecer la posible relación entre la actividad de la vía de las pentosas fosfato y los estadios de maduración in vitro de los ovocitos porcinos. Los COCs fueron obtenidos por aspiración de folículos antrales (3-8mm) de ovarios provenientes de cerdas de faena. La maduración se realizó durante 48 hs. en medio 199 suplementado con gonadotrofinas a 39ºC, 5% CO2 en ambiente humidificado. La actividad de la vía se determinó incubando los COCs durante las últimas 3 hs. de maduración en medio de cultivo adicionado con 4,8 µM de Azul Brillante de Cresilo. Los ovocitos provenientes de COCs que poseen baja actividad de la vía de las pentosas fosfato mantienen coloración azul, mientras que aquellos con alta actividad de la vía se decoloran. El progreso meiótico se determinó evaluando los diferentes estadios nucleares: vesícula germinal, ruptura de vesícula germinal, metafase I y metafase II. La asociación estadística entre las variables se determinó por la prueba de independencia de Chi-cuadrado. Se observó que los ovocitos con actividad de la vía de las pentosas fosfato no permanecieron en estadio de vesícula germinal y una alta proporción de los mismos alcanzaron el estadio de metafase II, demostrando la asociación entre las variables (p=0,0000). Mientras que no se evidenció asociación entre la actividad de la vía metabólica y la permanencia en los estadios nucleares intermedios (ruptura de vesícula germinal y metafase I). Por lo tanto, la actividad de la vía de las pentosas fosfato estaría relacionada con la capacidad de los ovocitos porcinos de reanudar la meiosis y completar la maduración nuclear.