INVESTIGADORES
ALVAREZ Gabriel MartÍn
congresos y reuniones científicas
Título:
Effect of cumulus type and cysteine in the level of reactive oxygen species produced in the in vitro maturation of porcine oocytes
Autor/es:
GABRIEL MARTIN ALVAREZ; EUGENIA FERRETTI; BRUNO VECCHI GALENDA; GABRIEL CARLOS DALVIT; PABLO DANIEL CETICA
Lugar:
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires
Reunión:
Jornada; II Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; 2010
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires
Resumen:
Los cultivos in vitro presentan mayor concentración de oxígeno que los ambientes in vivo, produciendo un aumento en los niveles de especies reactivas del oxígeno (ROS). Las ROS pueden producir modificaciones oxidativas que alteran el funcionamiento celular. La presencia de cisteína en el medio de cultivo sería necesaria para mejorar la maduración del ovocito porcino in vitro. Hemos demostrado anteriormente que en la maduración in vitro el metabolismo del complejo ovocito-cumulus (COC) porcino y la maduración citoplasmática del ovocito dependen de las características del cumulus que rodea al gameto. El objetivo fue evaluar la influencia de la adición de cisteína en la producción de ROS y en la maduración in vitro de los ovocitos de las diferentes clases de COCs. Los COCs fueron obtenidos por aspiración de folículos antrales (3-8mm) de ovarios provenientes de cerdas de faena y clasificados bajo lupa estereoscópica en A1: cumulus íntegro y oscuro; A2: cumulus íntegro y claro; B1: ovocitos rodeados sólo por la corona radiata; B2: ovocitos parcialmente desnudos. La maduración se realizó por 48 hs. en medio 199 con o sin 0,57 mM de cisteína y la fecundación en medio mTBM con semen fresco. El nivel de ROS se determinó en ovocitos inmaduros y madurados por el cociente entre las tinciones 2´,7´ diclorodihidrofluoresceína y diacetato de fluoresceína. La maduración meiótica se determinó por presencia de la placa cromosómica en metafase II y la maduración citoplasmática por presencia de cabezas espermáticas descondensadas y/o pronúcleos. La producción de ROS disminuyó debido a la maduración (p
