Caracterización molecular y taxonomía clásica de Aethina tumida: desafíos para detectar y determinar al Pequeño Escarabajo de la Colmena (PEC) y otros nitidúlidos asociados a colmenas

FERNANDEZ DE LANDA, GREGORIO ; PORRINI, MARTÍN P; PORRINI, DARÍO P; FARINA, JUAN LUIS ; CORREA-BENÍTEZ, ADRIANA ; EGUARAS, MARTÍN; QUINTANA , SILVINA

Workshop; Primer workshop Latinoamericano de Sanidad apícola; 2018

El Pequeño Escarabajo de la Colmena (PEC), descripto por primera vez en 1867, es originario de África y pertenece a los coleópteros de la familia Nitidulidae, conteniendo ~ 2800 especies. En el territorio argentino, la subfamilia Nitidulinae comprende 34 especies repartidas en 13 géneros, y a la fecha no hay registros para las especies que conforman el grupo Aethina. Debido a su impacto en la colonia de abejas melíferas, reportado desde finales de los 90´, su rápida dispersión y la posibilidad latente de su introducción en el territorio argentino, resulta indispensable lograr la validación de métodos confiables para su identificación. Con el objetivo de efectuar la puesta a punto para la detección de Aethina tumida, se realizaron ensayos de PCR en tiempo real, utilizando dos pares de cebadores específicos previamente reportados para su detección, así como la caracterización molecular de los ejemplares analizados mediante amplificación de la región COI del ADN. Se extrajo ADN total de 3 ejemplares presuntivos del PEC (larva e imagos), obtenidos del estado de Aguas calientes (México), cuya determinación previa coincidió con lo reportado morfológicamente para la especie. Se realizaron reacciones de PCR en tiempo real que amplificaron fragmentos de 109 y 139 pb de A. tumida y una PCR de la región COI que amplifica un fragmento de 1080 pb. Los productos de amplificación de la región COI fueron purificados, secuenciados, y analizados mediante el software BLAST. Las tres muestras analizadas fueron positivas con los tres pares de cebadores testeados. Las secuencias mostraron alta homología (99%) con secuencias de A. tumida provenientes de Canadá y Estados Unidos. La posibilidad de contar con la puesta a punto del análisis de determinación molecular significa una importante herramienta disponible para el servicio a terceros y para el desarrollo de investigaciones en el tema. Sin embargo, la colaboración interdisciplinaria para combinar el diagnóstico diferencial por taxonomía clásica con el diagnóstico molecular, será necesaria para descartar posibles problemas de sensibilidad de los cebadores con otras especies de la subfamilia.