Primera detección molecular de la variante B del virus de las alas deformes (DWV-B) en colonias de Apis mellifera de la provincia de Buenos Aires, Argentina

BRASESCO, CONSTANZA ; SILVINA QUINTANA; DI GERÓNIMO, VANESA ; GENCHI GARCIA, MARÍA LAURA ; SGUAZZA, HERNAN; BRAVI, MARÍA EMILIA ; EGUARAS, MARTÍN ; REYNALDI, FRANCISCO ; MAGGI, MATÍAS

Mar del Plata.

Workshop; Primer workshop Latinoamericano de Sanidad apícola; 2018

Apis mellifera puede ser infectada por más de 24 tipos de virus, la mayoría de ARN pertenecientes a las familias Dicistroviridae y Flaviviridae. El virus de las alas deformadas (DWV) es considerado de los más importantes por su asociación a las mortalidades invernales en regiones templadas. El DWV es transmitido por el ácaro ectoparásito Varroa destructor aumentando su prevalencia y virulencia en las colonias de abejas. Últimamente han tomado relevancia las variantes de DWV, siendo DWV-A y DWV-B las más comunes. Ambas se relacionan estrechamente, recombinándose entre ellas. El objetivo de este estudio fue detectar, mediante RT-qPCR en tiempo real, la presencia de DWV-B en abejas adultas de colonias de la provincia de Buenos Aires. Se extrajo el ARN total de grupos de 10 abejas adultas, de 24 colonias en total, de 22 localidades de la provincia de Buenos Aires. El RNA se digirió con DNasa y luego se realizaron reacciones de RT-qPCR en tiempo real para detectar la presencia de DWV-B con partidores específicos, de amplicón de 204pb, de la región de la poliproteína estructural del genoma del virus. Para confirmar la detección se utilizó un segundo par de partidores que amplifican 660pb de la proteína helicasa del virus. Como control interno para verificar la correcta extracción de ARN y la ausencia de inhibidores se realizó una amplificación de β-actina de A. mellifera. Los productos de PCR de DWV-B fueron purificados y secuenciados para verificar que los mismos correspondieran a la secuencia de DWV-B analizándolos mediante el software Blast (NCBI). De las 24 muestras analizadas, 21 (83%) fueron positivas, siendo este el primer reporte de detección de DWV-B en Argentina. Futuros estudios permitirán determinar el impacto de esta variante per se, su capacidad de recombinación con la variante A, así como también comparar el efecto patogénico de estos recombinantes.