CARACTERIZACIÓN DE LA MICROFLORA INTESTINAL DE APIS MELLIFERA MEDIANTE HIGH RESOLUTION MELTING (HRM) Y SECUENCIACION

DI MEGLIO, LG; DI GERÓNIMO, V;; QUINTANA, S; GENDE, LB

Congreso; XII Encuentro Biólogos en Red; 2017

ASOCIACIÓN JÓVENES INVESTIGADORES EN FORMACIÒN

La flora microbiana presente en el intestino de los insectos cumple funciones tanto a nivel del individuo, como a nivel ecológico y evolutivo. La misma participa en la asimilación de nutrientes, en la respuesta inmune e incluso tiene efecto sobre el comportamiento. Descripto como uno de los grandes reservorios de diversidad microbiana escasamente caracterizados, el intestino de las abejas aloja una numerosa comunidad de bacterias simbiontes. El objetivo del presente trabajo consistió en caracterizar la flora microbiana predominante del intestino medio de Apis mellifera mediante High Resolution Melting (HRM) y posterior secuenciación. Lo propuesto se llevó a cabo a partir de coloniasaisladas de diferentes medios de cultivo específicos para bacterias y hongos, utilizando abejas pecoreadoras y nodrizas. Se efectuaron amplificaciones por PCR en tiempo real correspondientes a un fragmento del gen codificante para el ARNr 16s (bacterias) y para los espacios intergénicos ribosomales (ITS) de hongos y se realizó un análisis de HRM. Los amplicones que presentarondiferentes perfiles de melting fueron secuenciados e identificados por afiliación taxonómica mediante análisis bioinformático con el programa BLAST (Basic Local Alignment Search Tool). A partir de este estudio se identificaron representantes bacterianos afiliados con los géneros Citrobacter, Enterobacter y Staphylococcus. Entre los hongos aislados se identificaron organismos afiliados a los géneros Candida, Cladosporium y Hanseniaspora. En conclusión, se consiguió aislar y caracterizar integrantes de la flora intestinal de A. mellifera. Por otra parte, se distinguieron mediante HRM los amplicones de aquellos aislados con distinta secuencia nucleotídica. La implementación de la técnica de HRM como método de screening resultó eficiente en este campo de investigación