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En más del 95% de pacientes con neoplasia endocrina múltiple tipo 2 (MEN-2) se han identificado mutaciones activadoras del proto-oncogén RET. La detección de estas mutaciones en familias con MEN- 2 permite el diagnóstico y tratamiento precoz de los familiares del caso índice con alto riesgo de desarrollar la enfermedad. Existen diversos métodos para la detección de mutaciones puntuales en los diferentes exones del proto-oncogén RET, siendo la secuenciación automática la técnica de referencia. Es el objetivo de este trabajo determinar la utilidad de la técnica de HRM como método de screening de mutaciones en los exones 10 y 11 del proto-oncogén RET. En los ensayos se utilizaron muestras de pacientes estudiadas previamente por secuenciación. Para la detección de mutaciones en el exón 10 se procesaron 30 muestras de ADN las cuales presentaban las mutaciones Cys620Ser, Cys609Arg, Cys618Phe, Cys620Arg, Cys611Phe,Cys620Ser,Cys609Arg y también controles (normales) wild type. Para el estudio del exón 11 se procesaron 27 muestras de ADN que presentaban las mutaciones Cys634Tyr, Cys634Gly, Cys634Phe, Cys634Arg y controles wild type. Las amplificaciones por PCR en tiempo real y el análisis por HRM se llevaron a cabo en un Termociclador Rotor Gene Q con Evagreen como intercalante fluorescente. Las técnicas desarrolladas mostraron una concordancia total con la técnica de secuenciación automática mostrando una sensibilidad del 100% para la detección de las mutaciones en los exones 10 y 11 del proto-oncogén RET ensayados en este trabajo. El análisis por HRM es un método no destructivo, por lo cual el producto generado puede ser utilizado directamente para su secuenciación. En conclusión, la técnica de HRM presenta varias ventajas como método de screening de la presencia de mutaciones en los exones 10 y 11 del proto-oncogén RET debido a su alta sensibilidad y rapidez (

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