Detección mediante PCR en tiempo Real de tres virus patógenos de Apis mellifera en el sudeste de la provincia de Buenos Aires

BRASESCO CONSTANZA ; QUINTANA SILVINA ; NEGRI PEDRO ; MEDICI SANDRA; RUFFINENGO SERGIO ; EGUARAS MARTIN ; MAGGI MATÍAS

Congreso; VIII Encuentro Biólogos en Red; 2013

ASOCIACIÓN JÓVENES INVESTIGADORES EN FORMACIÒN

Apis mellifera es infectada por 22 tipos de virus diferentes de los cuales, el virus de las alas deformes (DWV), el de la parálisis aguda Israelí (IAPV) y el de la parálisis aguda (ABPV) fueron implicados en pérdidas masivas de colmenas observadas mundialmente. El objetivo de este estudio fue detectar la presencia de dichos virus en colonias de abejas del sudeste de la provincia de Bs As. Se colectaron 20 muestras: 4 provinieron del Apiario A (38° 10' 06" S; 57° 38' 10" O) y 16 del Apiario B (37° 56' 0.69" S; 57° 40' 40.53" O). Las muestras consistieron de ácaros (Varroa destructor), pupas y abejas adultas obtenidas a partir de colonias de abejas que presentaban síntomas de infecciones virales (DWV, IAPV, ABPV y virus de la cría ensacada: SBV). Las muestras fueron conservadas a -80°C hasta ser procesadas. Luego se procedió a extraer el ARN, se digirió con DNAsa y se efectuaron reacciones de RT-PCR en tiempo Real para detectar la presencia de SBV, DWV, IAPV y ABPV. Todos los ensayos de PCR en tiempo Real fueron llevados a cabo con Evagreen como intercalante fluorescente. Previo a los ensayos de detección de virus se realizó una amplificación de β-actina de abejas como control interno para chequear la correcta extracción del ARN y la ausencia de inhibidores para evitar los falsos negativos. Se detectó la presencia de virus en un 35% del total de las muestras analizadas y todas provenientes del Apiario B; detectándose SBV y IAPV en pupas y abejas adultas respectivamente, y DWV en abejas adultas y en ácaros provenientes de las mismas colonias. Este último fue encontrado con alta carga viral en abejas con alas deformes (sintomáticas) y con menor carga viral en abejas asintomáticas. El ABPV no fue detectado en ninguna de las muestras analizadas.