pH como control de calidad de la desvitalización tisular

DENNINGHOFF V; UCEDA A; OSSANI G; GARCIA A; AVAGNINA A; MARTINS V; CARRARO D; SOARES F; CAMPOS A

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

INTRODUCCION: El impacto de la devitalización en el proceso de congelamiento es incierto. Si los cambios en la expresión génica derivadas de isquemia introdujesen suficiente variabilidad en los datos de microarreglos, la sensibilidad y especificidad clínica del ensayo podrían verse afectados negativamente. El objetivo general del trabajo es evaluar el impacto que tiene el tiempo de devitalización tisular de muestras biológicas, bajo un estricto protocolo estandarizado con altos criterios de control de calidad. DISEÑO DEL ESTUDIO: Cincuenta y seis ratones (Mus musculus) C57Bl/6 SPF del Bioterio del Centro del (CIPE) del Hospital A.C. Camargo SP Brasil, fueron divididos en 5 grupos de acuerdo al tiempo de criopreservación del tejido (0, 15, 30, 45, 60 minutos). El procedimiento de extracción de órganos fue realizado bajo flujo laminar bajo condiciones de asepsia quirúrgica. Se extrajeron y pesaron ambos pulmones, ambos riñones, e hígado (anterior y posterior). Al completarse el tiempo de criopreservación se midió el pH por duplicado a temperatura ambiente con un Dual Channel pH-Ion-meter Accumet Excel XL25. Se estudió la histología (HE). Las diferencias globales entre los diferencte órganos y entre los diferentes tiempos se analizaron con el test de Kruskal-Wallis; la comparación posterior de cada uno de los grupos se realizó con el test de Mann Whitney con corrección de Bonferroni. RESULTADOS: Se hallaron diferencias significativas para los valores del pH entre los órganos para un mismo tiempo y entre los tiempos para un mismo órgano. Se observó un aumento del pH para los tres órganos con un máximo a los 30 minutos. Los pH del pulmón fueron mayores. En la evaluación de la histología, no se hallaron diferencias entre los tiempos en la histoarquitectura de los órganos. CONCLUSION: La determinación del pH podría ser considerado un parámetro para medir la desvitalización tisular, entre tiempos y entre órganos. Estas variaciones del pH tisular tejido y tiempo específicos podrían estar induciendo diferentes cambios en la expresión génica de los tejido-temporo-espaciales.