Optimization of a Real Time PCR protocol for the differential detection of ruminant alphaherpesviruses

G. MANNA, M. SCICLUNA, A. DAMIANI, R. LORENZETTI, T. PALMERINI, E. LETIZIA, D. CACIOLO, D. AMADDEO, G. AUTORINO

Congreso; Congress of the Italian Society of Veterinary Diagnosis, SIDILV; 2005

E stato sviluppato un metodo real-time PCR per la ricerca di una porzione del genoma codificante per la glicoproteina B (gB) degli alphaherpesvirus dei ruminanti. Il test è risultato in grado di rilevare tutti i ceppi virali dei ruminanti appartenenti alla sottofamiglia sottoposti a controllo (BHV1.1, BHV1.2, BHV5, BuHV1 e CapHV1), mentre ha fornito esito negativo rispetto ad altri alphaherpesvirus responsabili d?infezione in altre specie (EHV1, EHV4, SHV1, CanHV e HSV1 e FelHV1). Inoltre, i primers selezionati non hanno amplificato il genoma di un ceppo di campo di Ovhv2, identificato da bufalo (gammaherpesvirinae). Il metodo è risultato in grado di rilevare il genoma virale di BHV1 e BuHV1 a diluizioni superiori di almeno un logaritmo in base 10 rispetto alle TDIC50 degli stessi virus in tessuto coltura. Viene discussa l?importanza di disporre di un metodo di screening da impiegare nella diagnostica corrente delle infezioni virali dei ruminanti di interesse zootecnico e, in particolare, nell?ambito dei piani di controllo ed eradicazione dell?IBR nelle specie bovina e bufalina.