Evaluación de la cinética de reparación del daño en el ADN en cultivos en monocapa de células HEK-293 expuestas a Roundup® Control Max

ROMA, DARDO A.; CECCHINI, MARIA E.; GIMENEZ, SABRINA; TONINI, MARÍA P.; CAPELLA, VIRGINIA; RODRIGUEZ, NANCY; AIASSA, DELIA E.; MAÑAS, FERNANDO J.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXI Congreso Argentino de Toxicología; 2019

Asociación Toxicológica Argentina

El Roundup® es el herbicida a base de glifosato más utilizado a nivel mundial. En Argentina se utilizan 200 millones de litros sobre unas 19 millones de hectáreas por año, principalmente asociadas al cultivo de soja transgénica. Por esta razón, la comunidad científica se centra en los efectos que la exposición al herbicida pudiera tener en la salud animal y humana, incluyendo su potencial carcinogénico. En el año 2015 la Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer reclasificó al glifosato en el grupo 2A, como un agente probablemente cancerígeno para humanos, debido a la fuerte evidencia de genotoxicidad. Los estudios que evaluaron la cinética de reparación del daño causado en el ADN por este compuesto son conflictivos. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la cinética de reparación del daño en el ADN in vitro en la línea celular Hek-293, proveniente de células de riñón de embrión humano, producida por la exposición al herbicida Roundup® Control Max en concentraciones halladas en sangre y leche materna de personas expuestas al herbicida, fundamentalmente a través de sus residuos en alimentos. Se analizaron 3 concentraciones de Roundup® Control Max (equivalente a glifosato ácido 72 % p/p): 70, 700 y 3500 µg/l, las cuales demostraron ser genotóxicas en ensayos previos. Como control negativo se utilizó solo medio de cultivo. Las células correspondientes a los 3 tratamientos estuvieron expuestas durante 24 horas a las diferentes concentraciones de Roundup® y posteriormente se resuspendieron en medio de cultivo para dar lugar al proceso de reparación. Se cuantificó el daño al ADN tras 1, 2 y 4 horas de incubación en medio de cultivo solo, a través del Ensayo Cometa empleando como parámetro el Momento de la cola. Al finalizar este período de 4 horas, las células repararon significativamente las lesiones del ADN inducidas por la exposición previa a 70 y 700 µg/l de Roundup®. Sin embargo, las células que inicialmente se expusieron a la mayor concentración evaluada (3500 µg/l), no pudieron reparar completamente las rupturas de las cadenas de ADN. El nivel de daño al ADN entre las células del grupo control y las expuestas a 3500 µg/l de Roundup® siguió resultando estadísticamente significativo (p≤0,01, Test de KruskalWallis y post Test de Dunns). Esta reparación deficiente puede desencadenar mutaciones en la molécula de ADN, debido a que las ADN polimerasas durante la replicación pueden insertar bases incorrectas frente a las bases complementarias dañadas. Esas mutaciones en oncogenes, genes supresores de tumores o genes que controlan el ciclo celular pueden ser causantes de diversas patologías, incluidas las enfermedades neoplásicas.