La deformación mecánica induce apoptosis de células tubulares proximales HK2 por inhibición de la isoforma 1 del intercambiador de Na+/H+, NHE1

BOCANEGRA VICTORIA; GIL LORENZO ANDREA; RINALDI TOSSI MARTÍN; CACCIAMANI VALERIA; BENARDON MARÍA EUGENIA; GARRAMUÑO VALLÉS, PATRICIA

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

La nefropatía obstructiva constituye la primera causa de fallo renal crónico en niños. La injuria mecánica por obstrucción incluye incremento de presión hidrostática intraluminal y dilatación tubular, un importante estrés por estimulación mecánica de las células tubulares renales que conduce a muerte celular por apoptosis y atrofia tubular. La apoptosis requiere acidificación del pH intracelular para la acción de Caspasas resultando crítico para la célula la actividad de NHE1, que intercambia un H+  intracelular por un Na+ extracelular regulando el pH intracelular y el volumen celular. La actividad del intercambiador podría estar influenciada por las Mapas y la vía de RhoA. Objetivo: Evaluación temporal de la inducción apoptótica en células tubulares proximales sometidas a deformación mecánica in Vitro y participación de MAPKs y RhoA en la regulación de NHE1. Métodos: se utilizaron células epiteliales tubulares proximales humanas inmortalizadas, HK2 sometidas stretch mecánico. Se analizó apoptosis con Anexina V por citometría de flujo y expresión de NHE1, Bcl2, Caspasa 3, ERK 1/2 Y RhoA por western blot. Resultados: demostramos apoptosis de HK2 luego de 90 y 180 minutos de stretch mecánico siendo positivas para Anexina V en 31 y 33% respectivamente en comparación co los controles. Observamos disminución significativa en la abundancia de la proteína antiapoptótica Bcl2 y aumento de Caspasa 3 asociada a reducción de la expresión de NHE1 en células HK2 sometidas a 90 y 180 minutos de stretch mecánico, precedido por activación de las vías de señalización ERK 1/2 Y RhoA (15 y 30 minutos). Conclusión: las células HK2 luego de 90 y 180 minutos de stretch mecánico experimentan disminución de NHE1 e inducción de la vía mitocondrial de la apoptosis. La secuencia de eventos por los cuales la activación de las MAPKs regula la actividad de NHE1 indica que la activación temprana de ERK 1/2  y de RhoA en HK2 participa en la fosforilación  de NHE1 y su posterior downregulación.