ANÁLISIS POR MICROSCOPÍA RAMAN DE LOS CAMBIOS EN LA ZONA PELÚCIDA DE OVOCITOS BOVINOS MADURADOS IN VITRO EN MEDIO ENRIQUECIDO CON EL FACTOR DE CRECIMIENTO ENDOTELIAL VASCULAR-D

LUIS EMANUEL JIMENEZ; DOMINGUEZ ALFREDO NICOLÁS; ROLDÁN-OLARTE, EUGENIA MARIELA; ÁLVAREZ, R.M.S.

El Calafate

Congreso; XXIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química inorgánica; 2023

Introducción: Numerosos estudios se enfocan en la optimización de la producción invitro (PIV) de embriones de animales de interés productivo, incluidos los bovinos. Lamaduración in vitro (MIV) de los ovocitos es la primera etapa de la PIV y puededeterminar el rendimiento del proceso y la calidad del futuro embrión. Por tanto, laoptimización de los medios MIV permitiría aumentar las tasas de fertilización ydesarrollo embrionario. El objetivo de este trabajo es evaluar el impacto del factor decrecimiento endotelial vascular-D (VEGF-D) en la zona pelúcida (ZP) de ovocitosbovinos durante la MIV, utilizando microscopía Raman.Resultados: Los espectros se tomaron de la ZP de ovocitos inmaduros y de aquellosque fueron sometidos al proceso de MIV durante 18 y 22 h en ausencia (muestrascontrol: 18H-C y 22H-C) y en presencia del factor (18H-F y 22H-F). En general, seobservó que los ovocitos sometidos a MIV presentan intensas bandas de proteínas yun marcado debilitamiento disminución de la altura de las señales específicas deazúcares. Al comparar entre sí los grupos madurados por distintos tiempos seobservaron importantes diferencias: I) se intensificaron las bandas de proteínas y deácido siálico en el espectro promedio 18H-F, con respecto al grupo 18H-C,presentando un perfil espectral similar a los ovocitos control madurados por 22H; II) en22H-F la intensificación de la banda del ácido siálico fue aún mayor y se observancambios sutiles en el contorno de la banda AmI. Tras la deconvolución de la bandaAmI, se deriva que la presencia del VEGF-D en los medios de maduración produce unincremento en la proporción de estructura desordenada de las proteínas, induciendocambios en la organización de las glicoproteínas presentes en la ZP. El análisisespectral se complementó con estadística; la Prueba-t determinó que la señal delácido siálico presentó un incremento estadísticamente significativo en los grupos deovocitos madurados en presencia del VEGF-D con respecto al grupo control; cabemencionar que el ácido siálico es el receptor primario de los espermatozoides1, por lo que su presencia en ovocitos madurados es muy importante.Conclusiones: Los resultados confirman que la suplementación del medio de maduración con VEGF-D produce cambios bioquímicos y estructurales relevantes en la ZP y, por tanto, podría tener un impacto favorable en el rendimiento de la PIV.