Caracterización de mutantes hrp de Xanthomonas axonopodis pv citri en la cancrosis de los cítricos y en la inducción de la respuesta hipersensible

DUNGER, GERMÁN; DAURELIO, LUCAS D.; ORELLANO, ELENA G.; OTTADO, JORGELINA

Rosario

Congreso; VI Congreso y XXIV Reunión Anual de Sociedad de Biología de Rosario; 2004

Sociedad de Biología de Rosario

El fitopatógeno Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) es el agente causal de la cancrosis de los cítricos, una seria enfermedad que afecta al genero Citrus y ocasiona grandes pérdidas en zonas de cultivo de cítricos en nuestro país. Los síntomas característicos de esta enfermedad incluyen la formación de pústulas blancas o amarillentas que luego oscurecen. Xac es una bacteria Gram (-) y utiliza el sistema de secreción de tipo III para translocar proteínas de patogenicidad y avirulencia a las células de la planta. Este sistema es codificado por el cluster hrp (respuesta hipersensible y patogenicidad). En ciertos casos la respuesta hipersensible (HR) es disparada en plantas no hospedadoras y en hospedadoras resistentes ante a la infección por el patógeno. La HR se caracteriza por una muerte celular rápida alrededor y en el sitio inicial de la infección. En este trabajo caracterizamos la participación del cluster hrp de Xac en la interacción con plantas hospedadoras y no hospedadoras. Estudiamos los operones hrpB y hrpD y el gen hrpF mediante la construcción de bacterias mutantes empleando conjugación con un vector movilizable suicida. Posteriormente, se efectuaron infecciones en hojas de plantas hospedadoras de naranja (Citrus sinensis) mediante infiltración de bacterias salvajes y mutantes, determinando que estas últimas no produjeron cancrosis, lo que fue confirmado mediante curvas de crecimiento de Xac en hojas. Asimismo, caracterizamos la interacción del fitopatógeno con diferentes plantas no hospedadoras: algodón, poroto, tabaco, tomate, pimiento y Nicotiana benthamiana. En todas las interacciones se produjo HR. Por otra parte, la infección de plantas de algodón con Xac mutantes no produjo HR. Los resultados obtenidos en las plantas no hospedadoras infectadas con Xac salvaje y mutantes fueron confirmados por tinción con azul de tripán que detecta células muertas y con diaminobencidina (DAB) que evidencia la presencia de especies reactivas del oxígeno. Se realizaron también ensayos de liberación de iones, característica de la HR. Podemos concluir que los genes presentes en los operones hrpB y hrpD y el gen hrpF son requeridos para la patogenicidad en plantas hospedadoras e inducción de la HR en plantas no hospedadoras.