Participación del EPS de Xanthomonas axonopodis pv. citri en la interacción planta patógeno

DUNGER, GERMÁN; RELLING, VERÓNICA; ORELLANO, ELENA G.; OTTADO, JORGELINA

Rosario

Congreso; VII Congreso y XXV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2005

Sociedad de Biología de Rosario

El genero Citrus es susceptible a gran variedad de fitopatógenos, siendo uno de los más agresivos Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), agente causal de la cancrosis de los cítricos. Los síntomas comienzan con una lesión húmeda localizada de coloración blanca o amarillenta que luego tiende a oscurecerse. La interacción de Xac con plantas no hospedadoras puede presentar una respuesta hipersensible (HR) caracterizada por la muerte celular rápida y restringida a la zona de ingreso del patógeno. Al igual que el resto de las especies del género, Xac se caracteriza por la producción de xantano, un polisacárido extracelular (EPS) formado por polímeros de unidades pentasacárido. En la polimerización y secreción de xantano en Xanthomonas campestris pv. campestris están involucrados 12 genes denominados gum, desde gumB hasta gumM. El producto del gen gumDcataliza la transferencia de glucosa-1-fosfato en el primer paso del ensamblado de las unidades pentasacárido. Con el objetivo de evaluar el rol del xantano en la interacción planta-patógeno se construyó una bacteria deficiente en la síntesis de xantano mediante deleción del gen gumD (XacDgum); y se corroboró mediante ensayo de outhern blot. Se infectaron 10 plantas hospedadoras de naranjo para evaluar la respuesta de XacDgum; advirtiendo el inicio de los síntomas al día 5 para ambas cepas de Xac sin observar diferencias en la infección promovidas por ambas bacterias en el 100 % de los tratamientos. Los datos fenotípicos se acompañaron con curvas de crecimiento de las bacterias salvaje y mutante en planta. En estas infecciones no se observaron diferencias de crecimiento entre cepas. Para evaluar la interacción con plantas no hospedadoras se realizaron infecciones en hojas de plantas de algodón, tomate y tabaco. Luego de 24 horas pudo observarse la formación de una zona necrótica en el lugar de infección, siendo idénticas tanto para el tratamiento con la cepa salvaje como en la mutante. Estas apreciaciones se constataron mediante ensayo de azul de tripán y DAB, donde se pudo corroborar la necrosis y la emisión de peróxidos característica de la HR. Se evaluó además, la supervivencia epifítica de XacDgum en hojas de naranjo, no observándose diferencias en el decaimiento del número de células entre la cepa salvaje y la mutante. Estos resultados indican que el xantano de Xac no tendría un rol indispensable en la interacción de la bacteria con plantas, tanto de tipo compatible como incompatible.