CUANTIFICACION DE LA DELECION COMUN 4977pb DEL ADN MITOCONDRIAL. SU RELACION CON ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR ATEROSCLEROTICA

POLISECKI, ELIANA; ARRUVITO, LOURDES; BERG, GABRIELA; SALA, ANDREA; DE LOS SANTOS, RAUL; SCHREIER, LAURA; CORACH, DANIEL

MAR DEL PLATA, ARGENTINA

Congreso; CONGRESO CONJUNTO DE SOCIEDADES BIOMEDICAS, XLIX REUNION DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION CLINICA; 2004

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION CLINICA

El ADN mitocondrial (ADNmt) tiene mayor susceptibilidad al daño oxidativo que el ADN nuclear. En estudios previos hemos observado acumulación de la deleción común de 4977pb en el ADNmt (4977-ADNmt) en muestras de músculos de fallecidos por muerte súbita en comparación con fallecidos por otras causas, lo cual se asociaría con la elevada incidencia de enfermedad cardiovascular (ECV) entre los primeros. Existen pocos trabajos que demuestren el acúmulo de esta deleción en pacientes con ECV, algunas controversias pueden deberse a las metodologías analíticas empleadas. Nos propusimos cuantificar la deleción 4977-ADNmt en 14 muestras de músculo estriado obtenido de pacientes sometidos a cirugías programadas, con diagnóstico de ECV (n=7, Fem/Masc:1/6, 38 a 82 años) y libres de ECV (n=7, Fem/Masc:3/4, 31 a 88 años), sin diferencias significativas en edad. No se incorporaron muestras de diabéticos. Se realizaron diluciones del ADN extraído -300 a 25 ng- para amplificar 389 pb que muestra presencia de deleción, y 75 a 0,1 ng para amplificar un fragmento de 440 pb del ADNmt total. Se fotografiaron productos de dilución en geles de agarosa y se cuantificó con Image Quant 5.1. A partir del gráfico semilog de disminución de DO de los productos de PCR en función de ng ADN, se calculó regresión lineal y la proporción de ng de 4977-ADNmt con respecto a ADNmt total. Las muestras ECV mostraron mayor acumulación de 4977-ADNmt (mediana: 0.052 % rango: 0.036-0.100) que las sin ECV (0.024%, 0.012-0.075), p=0.042. La deleción correlacionó con el aumento de la edad r=0.76, p=0.016. El aumento en la acumulación de 4977-ADNmt en ECV podría explicarse por el mayor estrés oxidativo asociado con la enfermedad isquémica. Cuantificar la deleción en un mayor número de muestras podría esclarecer mecanismos subyacentes de la enfermedad aterosclerótica.