La distrofina, nuevo blanco de la MMP-2 durante la isquemia miocárdica aguda

SIACHOQUE N; RODRIGUEZ J; BUCHHOLZ B; MIKSZTOWICZ V; BERG G; CELAYA C; DONATO M; GELPI R

Congreso; XXXVIII Congreso Argentino de Cardiología; 2012

Objetivos: Determinar si la distrofina es blanco de la calpaína o de la MMP-2, y si su degradación ocurre durante la isquemia aguda. Materiales y Métodos: Corazones aislados de conejos neozelandeses fueron perfundidos según la técnica modificada de Langendorff y sometidos a 30 minutos de isquemia global. En un segundo grupo, antes de la isquemia global se administró doxiciclina (inhibidor de MMP; 50 uM). Además, en corazones no sometidos a isquemia (normóxicos) se administró SIN-1 (estimulador de la producción de ONOO-; 100 uM) y se realizó un seguimiento por 30 min. Se consideró como control un grupo de corazones que fueron perfundidos en normoxia durante 30 min. Se evaluó la peroxidación lipídica a través de la técnica de TBARS, se analizó la expresión de distrofina y espectrina por Western blot y la actividad de MMP-2 por zimografía. Resultados: Se observó una disminución de un 79% en los niveles de distrofina, durante el periodo de isquemia, respecto del valor observado en los corazones normóxicos (p<0.05). Durante este mismo periodo no se evidenciaron cambios en los niveles de espectrina, dado que la espectrina es un sustrato específico de la calpaina, este resultado descarta la participación de la calpaina en la degradación de la distrofina. Por otro lado, durante la isquemia hubo un aumento de un 71% en la actividad de la MMP-2, respecto del grupo control (p<0.05). La administración de doxiciclina (inhibidor de MMP), antes de la isquemia, previno la degradación de la distrofina. La administración de SIN-1, a corazones normóxicos, aumentó la concentración de TBARS un 33% (p<0.05), la actividad de la MMP-2 un 36 % (p<0.05) y redujo significativamente los niveles de distrofina a un 61% respecto del control (p<0.05). Conclusiones: La activación intracelular de la MMP-2, por aumento del estrés oxidativo, es responsable de la degradación de la distrofina. Este es el primer trabajo que demuestra a la distrofina como un nuevo sustrato para la MMP-2 en el contexto de la injuria isquémica.