INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA FOSFATASA ALCALINA NO ESPECÍFICA DE TEJIDO

ANTONENA YAMILA B ; GISELA M GADDI; EVELINA G. FERRER

LA PLATA

Encuentro; PRIMER ENCUENTRO DE ESTUDIANTES DE EXACTAS; 2023

FACULTAD CS EXACTAS UNLP

La fosfatasa alcalina (FAL) es un enzima capaz de hidrolizar enlaces fosfato de diversos sustratos con el fin de controlar la bioseñalización celular. Esta proteína presenta varias isoenzimas, una de ellas, es la FAL no específica de tejido.Esta isoenzima es importante en el metabolismo mineral óseo; porque cumple con estas funciones: A) Desfosforilar a la matriz extracelular para permitir la liberación de fosfato inorgánico al medio para luego reaccionar con Calcio y formar los depósitos de hidroxiapatita. B) Interviene en la diferenciación de los osteoblastos a osteocitos (células formadoras de hueso). C) Incrementa la síntesis de colágeno Tipo I, que es la proteína mayoritaria en la matriz extracelular ósea.Una sobreexpresión de FAL involucra una desregulación de la desfosrilación en diversos tejidos generando cristales de hidroxiapatita en riñón, vasos sanguíneos y la calcificación de tumores. Se conoce que diversos fármacos como sulfonamidas cíclicas ó híbridos de chalcona-sulfonamidas que se comportan como son inhibidoras de la FAL. En el CEQUINOR, nuestro grupo de investigación se encuentra estudiando la inhibición de la actividad fosfatasa empleando una base de schiff (BS) (fórmula química: C11H14N2O3S) derivada del fármaco antitiroideo/anticancerígeno sulfanilamida. Se evaluará la actividad fosfatasa en presencia y/o ausencia de BS mediante el seguimiento de la reacción de desfosforilacion de p-Nitrofenilfosfato y la aparición de p-Nitrofenol midiendo la absorbancia de su banda característica a 405 nm durante una hora (lectura continua). Se calcularán los parámetros cinéticos característicos de FAL (Km y Vmax) empleando la ecuación de Michaelis-Menten y se evaluara la unión FAL-BS mediante el registro de la desactivación de la señal fluorescente de los residuos aromáticos (tirosina, triptófano) de la proteína.Para completar este estudio, en un futuro inmediato se procederá a realizar la síntesis de complejos metálicos coordinados con Cu(II) y Zn(II) derivados de BS a fin de realizar un análisis comparativo en cuanto a la cinética enzimática de FAL en presencia de los compuestos que se van a sintetizar.