MVAD008-F ADMINISTRADO POR VÍA INTRANASAL O SISTÉMICA INDUCE RESPUESTA INMUNE ESPECÍFICA FRENTE AL BRSV EN RATONES

FERELLA A, GARANZINI D, PEREZ AGUIRREBURUALDE M S, ELISEI A, MOSGOVOJ M; CALAMANTE G5, DEL MEDICO ZAJAC M P

CABA

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Sociedad Argentina de Virología

El virus respiratorio sincicial bovino (BRSV) es una de las principalescausas de neumonías en terneros de temprana edad a nivel mundial. Sibien hay disponibles en el mercado vacunas convencionales, existe unademanda creciente en cuanto al desarrollo de vacunas de nuevageneración, más eficientes, capaces de inducir respuesta inmunehumoral y celular. Una estrategia en el desarrollo de vacunas es elempleo de vectores virales, como el virus vaccinia Ankara modificado(MVA), que expresen proteínas inmunorrelevantes. El MVA esampliamente utilizado para el desarrollo de vacunas seguras y efectivaspara humanos y en medicina veterinaria. Previamente, en nuestrolaboratorio, se obtuvo el virus MVAd008-F, que carece del gen quecodifica para la proteína de unión a la citoquina IL-18 y porta el gencodificante de la proteína F de BRSV. Esta proteína se encuentraaltamente conservada entre las distintas cepas de BRSV y es la principalinductora de anticuerpos neutralizantes.El objetivo de este trabajo consistió en la evaluación de lainmunogenicidad del MVAd008-F, administrado por una vía de mucosasy por vía sistémica, en el modelo murino.Para evaluar la respuesta inducida a nivel de mucosas, se inmunizaronratones BALB/c por vía intranasal con los virus MVAd008-F o MVA norecombinante. Se aplicaron dos dosis separadas 21 días y a los 14 díaspost revacunación, se sacrificaron los ratones, se obtuvieron lavadosnasales y broncopulmonares y muestras de suero. En segundo lugar, seevaluó la inmunogenicidad de MVAd008-F por vía sistémicainmunizando ratones a los 0, 21 y 44 días por vía intraperitoneal. Serealizaron esquemas de inmunización homólogos (tres dosis de MVArecombinante) y heterólogos (combinando a los MVA recombinantescon la proteína F producida en el sistema de baculovirus-células deinsecto o el plásmido pTT5-F). Se tomaron muestras de suero a distintostiempos post vacunación y se extrajeron los bazos a los 59 días. Lapresencia de anticuerpos anti-BRSV se analizó por ELISA yseroneutralización viral. La secreción de IFN-γ en sobrenadantes decultivo de esplenocitos estimulados con BRSV se evaluó utilizando un kitcomercial.Se observó que la administración de dos dosis del vector viral MVAd008-F por vía intranasal indujo anticuerpos específicos contra BRSV en sueroy anticuerpos IgA específicos en lavados nasales de los ratonesinoculados. Asimismo, la vacunación con MVAd008-F por vía sistémicatanto en un esquema homólogo como heterólogo (combinado con laproteína F) estimula la producción de anticuerpos neutralizantes deBRSV y la secreción específica de IFN-γ, evidenciando una respuestabalanceada Th1-Th2. En este trabajo se demostró la capacidad de losMVAd008-F de inducir una respuesta inmunitaria humoral y celularespecífica contra BRSV en ratones al administrarse por vía de mucosas ysistémica. A futuro, se evaluará la protección conferida por MVAd008-Futilizando el modelo murino de cuantificación de la función pulmonar.