Optimización de la inmunogenicidad contra Babesia bovis inducida por esquemas de vacunación combinando un virus vaccinia Ankara modificado y proteínas recombinantes.

JARAMILLO ORTIZ, J.; MOLINARI, P.; PAOLETTA, M.; ZANETTI, F.; DEL MÉDICO ZAJAC, M.P.; WILKOWSKY, S.

CABA

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología y II Congreso Argentino de Microbiología ambiental; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

La babesiosis bovina es una infección causada por los parásitos intraeritrocíticos Babesia bovis y B. bigemina que genera importante mortalidad en el ganado del norte argentino. Actualmente, la vacunación se realiza utilizando cepas atenuadas del parásito que si bien son efectivas aplicando una sola dosis, presentan ciertas desventajas relacionadas con su producción y almacenamiento. Por ello existe una tendencia a reemplazar su uso por vacunas de diseño racional, que incluyan uno o más antígenos y que sean capaces de inducir una respuesta inmune protectora. En este sentido, los vectores virales no replicativos son buenos candidatos por su versatilidad para la expresión de proteínas heterólogas y su comprobado perfil de seguridad. En particular el virus vaccinia Ankara modificado (MVA) ha sido evaluado con éxito como candidato a vacuna para la prevención de enfermedades de interés en salud humana y veterinaria, administrándolo en esquemas de tipo prime-boost combinado con el mismo antígeno expresado en otro sistema procariota o viral. Previamente, en nuestro laboratorio se obtuvo un virus MVA recombinante que expresa in vivo una poliproteína conformada por una fusión traduccional de fragmentos antigénicos de las proteínas Msa-2c, RAP-1 y Hsp20 de B. bovis (multiantígeno: MABbo). El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad inmunogénica del MVA recombinante (MVA-MABbo) utilizando estrategias de vacunación prime-boost. Para ello, se inmunizaron 5 grupos de 5 ratones BALB/c cada uno. El grupo 1 (G1) recibió 1x107 UFP de MVA-MABbo y 14 días después 50 μg de una mezcla de las proteínas Msa-2c, RAP-1 y Hsp20, expresadas en E. coli y purificadas por columnas de afinidad (vacuna a subunidad, VS). El G2 recibió el tratamiento inverso al G1 (VS/MVA-MABbo). Los grupos G3, G4 y G5 recibieron 2 dosis de VS, MVA-MABbo o MVA salvaje, respectivamente. A los 14 días de la segunda inmunización se observó la inducción de altos niveles de anticuerpos de tipo IgG contra las 3 proteínas de B. bovis en los grupos G1, G2 y G3 (títulos entre 1600 a 12500) mientras que en el grupo G4 el título fue menor a 50. Como era de esperar en el grupo control G5 no se observaron IgG específicas contra ninguna de las 3 proteínas. En cuanto a la respuesta tipo T específica frente a antígenos de B. bovis, se determinó que los niveles de IFNγ detectados por ELISA en los sobrenadantes de esplenocitos de los G1, G2 y G4 fueron hasta 3 veces mayores a los obtenidos en el G5. Estos resultados indican que la estrategia de inmunización con el MVA-MABbo en combinación con vacunas a subunidades induce una respuesta inmune humoral y celular específica en el modelo murino. En una próxima etapa, la inmunogenicidad y protección conferida por estas vacunas se evaluará en bovinos, único modelo biológico para Babesia bovis.