Optimización de los vectores basados en virus vaccinia Ankara modificado.

. DEL MÉDICO ZAJAC, M. PAULA; PASCUTTI, M. FERNANDA; FALIVENE, JULIANA; GHERARDI, M. MAGDALENA Y CALAMANTE, GABRIELA

Congreso; XXIX Reunión Científica Anual de la SAV.; 2009

El virus vaccinia Ankara modificado (MVA) es una cepa altamente atenuada del virus vaccinia que posee grandes deleciones genéticas y está siendo evaluado en ensayos clínicos de vacunas contra el cáncer, malaria, tuberculosis y sida. MVA conserva varios genes virales con funciones inmunomoduladoras y aún debe definirse la relevancia de los mismos en las vacunas basadas en este virus. Objetivo: obtener virus MVA recombinantes deletados en el gen 008L (codificante para IL-18bp) o los genes 157-159 (codificantes para 3beta-hidroxiesteroide deshidrogenasa y proteína viral con dominio TIR, respectivamente), y virus dobles recombinantes (delta008Ldelta157/159). Para obtener los virus MVAdelta008 y MVAdelta157/159 se transfectaron con el vector de transferencia (VT) VT-delta008-betagal o VT-delta157/159-GUS cultivos FEP previamente infectados con MVA. En el caso del doble recombinante, las células se infectaron con el virus MVAdelta157/159-GUS y se transfectaron con el VT-delta008-betagal. Los virus recombinantes producidos se seleccionaron y purificaron en un cultivo agarizado en presencia del sustrato específico (X-gluc o Bluogal). Los MVA deletados obtenidos fueron caracterizados por PCR para confirmar la deleción y la pureza del stock viral. Finalmente, se evaluó la inmunogenicidad del virus MVAdelta008 en ratones, observándose una mayor inducción de respuesta TCD8+ a epitopes del vector respecto a la generada por el virus MVAwt.