Estudio de la deleción de tres genes del vector viral MVA relacionados con la evasión de la respuesta inmune: efecto sobre su inmunogenicidad frente a epitopes de VV.

HOLGADO, M.P.; FALIVENE, J.; DEL MÉDICO ZAJAC, M.P.; PASCUTTI, M.F.; MAETO, C.A.; RODRͬGUEZ, A.M.; CALAMANTE, G.; GHERARDI, M.M.

Vaquerias, Cordoba

Congreso; XXXII Reunión Científica Anual de la SAV; 2012

El virus MVA (Modified Vaccinia Ankara) es una cepa atenuada del virus Vaccinia que actualmente se lo utiliza como vector vacunal en ensayos clínicos contra infecciones tales como HIV/SIDA, Malaria y Tuberculosis. Esta cepa fue aislada luego de 570 pasajes de la cepa CVA (Cholioallanotis Vaccinia Virus Ankara) por fibroblastos de embrión de pollo tras lo cual perdió parte de su genoma. Las deleciones surgidas en su proceso de atenuación incluyen genes involucrados en la evasión de la respuesta inmune, como así también, relacionados con la virulencia y el rango de huésped, sin embargo, aún conserva algunos de los genes relacionados con la evasión al sistema inmune. Uno de estos genes con función inmunomoduladora que aún se conserva en el genoma de MVA es el C12L, cuyo producto es homólogo a la proteína de unión a la citoquina IL-18. Resultados previos de nuestro laboratorio en el que se generó un MVA con una deleción en dicho gen (MVAdeltaC12L), mostraron un aumento significativo en la inmunogenicidad frente a antígenos virales del vector, y más importante aún frente a antígenos de HIV. Existen otros genes con acción inmunomoduladora conservados por MVA, como A44L que codifica para una enzima implicada en la síntesis de hormonas esteroides con acción antiinflamatoria, o el gen A46R cuyo producto es una proteína con acción inhibitoria de la transducción de señales inducidas por receptores del tipo Toll, para los cuales aún no se han reportado los efectos de la deleción de los mismos del genoma de este vector. El objetivo de este estudio fue analizar la respuesta inmune generada por un vector MVA con una deleción abarcando los genes A44L y A46R. Para ello ratones de la cepa C57Bl/6 fueron inmunizados por ruta intramuscular con 107 pfu de MVAwt (sin deleciones dirigidas), MVAΔC12L, MVAdeltaA44L-A46R ó MVAdeltaC12L/deltaA44L-A46R, evaluándose tanto la respuesta aguda (7 días post infección) como la respuesta de memoria (40-45 días post infección). Se analizó la respuesta celular inducida cuantificando las células T productoras de IFN-gamma e IL-2 mediante la técnica de ELISPOT en células de bazo y ganglios inguinales (drenantes al sitio de inoculación). Resultados preliminares muestran un aumento en la respuesta T CD8+ y T CD4+ (frente a los péptidos B8R y L4R, respectivamente) en animales inmunizados con MVAdeltaA44L-A46R y MVAdeltaC12L/deltaA44L-A46R, tanto en respuesta aguda como de memoria. Esto sugiere que la deleción de dichos genes del genoma de MVA aumentaría la inmunogenicidad del vector y en consecuencia su potencial como vacuna.