Optimización del vector vacunal MVA tras la deleción del gen viral para la proteína IL-18bp.

FALIVENE, J.; RODRIGUEZ, A.M.; DEL MÉDICO ZAJAC, M.P.; PASCUTTI, M.F.; MAETO, C.A.; CALAMANTE, G. Y GHERARDI, M.M

CABA

Congreso; X Congreso Argentino de Virología,; 2011

El virus Vaccinia Ankara Modificado (MVA) es una cepa atenuada del virus Vaccinia (VV) que se utiliza en ensayos pre-clínicos y clínicos contra múltiples enfermedades infecciosas como HIV/SIDA, malaria y tuberculosis. A pesar de haber sufrido seis grandes deleciones durante el proceso de atenuación, MVA aún posee genes virales involucrados en la evasión del sistema immune del huésped, posibilitando incrementar su potencial como vector vacunal mediante la deleción de algunos de ellos. Entre estas secuencias conservadas en MVA se encuentra el gen C12L que codifica para una proteína soluble de unión a IL-18 (IL-18bp), capaz de inhibir su acción biológica. IL-18 es muy importante en la inmunidad antiviral por su capacidad de promover la secreción de distintas citoquinas y quimioquinas y activar a células NK y T citotóxicas. El objetivo de este trabajo consistió en evaluar los efectos de la deleción de este gen C12L del genoma de MVA, para lo cual se generó un virus carente de este gen (MVAΔIL-18bp). En primer lugar, se corroboró la ausencia del ADN correspondiente y mediante un ensayo biológico in vitro se verificó, por primera vez en MVA, la pérdida de actividad biológica asociada a la deleción de C12L. Posteriormente se evaluó in vivo la magnitud y calidad de la respuesta celular específica, contra antígenos del propio vector en las fases aguda y de memoria, mediante inmunizaciones simples por ruta sistémica. Se demostró, en las cepas murinas Balb/c y C57Bl/6, que tanto la magnitud como la calidad de la respuesta celular específica se incrementan luego de la inmunización con el vector delecionado, siendo mayor la cantidad de células TCD8+ y TCD4+ productoras de IFN-gamma IL-2 y con actividad citotóxica. Finalmente se demostró la existencia de un correlato entre el aumento en la magnitud de la respuesta celular de memoria conferida por MVAΔIL-18bp y el nivel de protección frente a un desafío intranasal con la cepa replicativa WR. Por último se demuestra que el vector resulta efectivo para incrementar la respuesta frente a antígenos de HIV-1 (NefB/F) al ser aplicado en esquemas de inmunización de ADN prime/MVA boost. Estos resultados demuestran que IL-18bp contribuye a la evasión de la respuesta inmune durante la infección con MVA, dado que su deleción del genoma viral potenció la inmunogenicidad de MVA observada frente a antígenos del propio vector y más importante aún contra antígenos deHIV.