Biocontrol de Xanthomonas axonopodis pv vesicatoria a través de bacteriocinas producidas por Pseudomonas

PRÍNCIPE, A.; TORASSO, M.; GODINO, A.; FERNANDEZ, M.; FISCHER, S.E.

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental (CAMAYA).; 2015

La mancha bacteriana, causada por Xanthomonas axonopodis pv vesicatoria, es una de las enfermedades más importantes del cultivo de tomate, la cual provoca significativas reducciones del rendimiento y de la calidad de los frutos. El objetivo principal de este trabajo fue determinar la capacidad antagónica de una bacteriocina tipo fago (piocina R) producida por Pseudomonas fluorescens SF4c contra X. axonopodis pv vesicatoria (Xcv Bv5?4a). Una ventaja que presentan las bacteriocinas es que no tienen efectos tóxicos en animales y humanos a diferencia de los bactericidas comerciales formulados principalmente a base de cobre; los cuales generan frecuentemente la aparición de cepas tolerantes además de producir un impacto negativo sobre el medio ambiente y la salud humana. Para evaluar el antagonismo in vitro, se llevó a cabo un ensayo de inhibición de Xcv Bv5?4a en placa empleando diferentes concentraciones de bacteriocina. La suceptibilidad del biofilm formado por Xcv Bv5?4a, a la piocina fue analizada en medio mínimo XVM2 empleando cristal violeta para la cuantificación. Ensayos de biocontrol in vivo: La supervivencia de Xcv Bv5?4a fue determinada en hojas de tomate pulverizadas con diferentes concentraciones de bacteriocinas: 700 y 1500 UA/ml. La infección fue realizada empleando una suspensión de Xcv Bv5?4a conteniendo aproximadamente 106 UFC/ml. El número de células viables/cm2 fue determinado a los 7 días post-infección. Los resultados fueron comparados a los controles empleados. Los ensayos fueron repetidos tres veces y analizados estadísticamente empleando el análisis de varianza de una vía (ANOVA) (p0,05). En condiciones in vitro, las células de Xcv Bv5-4a fueron suceptibles a concentraciones de 500 UA/ml de bacteriocina. Además esta piocina fue activa sobre el biofilm formado por Xcv Bv5-4a observando una disrupción significativa del mismo (60%) (p0,05).A partir de los ensayos in vivo se observó una reducción significativa de los síntomas de la mancha bacteriana en las hojas de plantas de tomate tratadas con la bacteriocina (1500 UA/ml). Estos resultados coincidieron con una disminución en el número de células viables de Xcv Bv5?4a (105 UFC/ml) comparado con las plantas infectadas empleadas como control (107 UFC/ml) (p≤0,05). Las hojas de estas plantas presentaron además, el desarrollo de lesiones típicas de la mancha bacteriana. El tratamiento más efectivo se obtuvo a partir de dos aplicaciones foliares de bacteriocinas post-infección (48 y 96 hs). Nuestros resultados indican que el empleo de las bacteriocinas tipo fago, como estrategia alternativa para el control del fitopatógeno X. axonopodis pv vesicatoria, podría reducir los síntomas de la mancha bacteriana en plantas de tomate. La información derivada de estos estudios nos permitirá desarrollar un producto efectivo para controlar algunas de las enfermedades que afectan su cultivo, contribuyendo así a la inocuidad de los productos derivados del mismo.