Cuantificación de ácidos biliares y colesterol por Liebermann-Burchard

SALAS BARBOZA, ARIELA G.; JUÁREZ, VÍCTOR D.; CAZÓN, ADA V.

Salta

Jornada; IV Jornadas de Comunicaciones de la Facultad de Ciencias Naturales; 2013

Facultad de Ciencias Naturales

La reacción de Liebermann-Burchard (L-B) es característica de los triterpenos y esteroides que tienen dos dobles enlaces conjugados, en un mismo anillo, en dos  anillos  adyacentes  o  un  doble  en  un  anillo adyacente con un grupo funcional hidroxilo. Prueba positiva un color azul o verde, y su absorción máxima en la región visible está entre 600 - 700 nm. La reacción de L-B se realiza en medio ácido fuerte con la gradual oxidación del colesterol hasta llegar a un cromóforo con máximo de absorción a 620 nm. Aún no se develó el mecanismo de esta prueba para los ácidos biliares. El objetivo del trabajo fue realizar la cuantificación de los ácidos biliares y colesterol mediante L-B. Se trabajó con diferentes concentraciones de ácidos biliares estándares (ácido litocólico, ácido deóxicólico y ácido cólico) y de colesterol, las lecturas de absorbancia se realizaron a 530 nm en espectrofotómetro. La reacción de L-B permitió realizar lecturas en espectrofotómetro y elaborar las curvas de calibración, las que se aplicaron para la cuantificación de los ácidos biliares. Los colores en los tubos de reacción y la intensidad resultaron particulares para cada ácido. El colesterol y el ácido lithocólico presentaron mayor intensidad de color, seguido por el ácido cólico, finalmente el ácido deoxicólico. Esto puede atribuirse a las características estructurales de los mismos. En posteriores experiencias se elaborarán los barridos espectrales desde 400 a 530 nm y se aplicarán los resultados de estas experiencias en la cuantificación de los ácidos biliares presentes en heces de mamíferos