Cuantificación de Glifosato y AMPA utilizando matrices de excitación-emisión de fluorescencia, y métodos de calibración multivariada

PÉREZ, ANA LAURA

Santa Fe

Encuentro; XVII Encuentro de Jóvenes Investigadores de la UNL; 2013

La provincia de Santa Fe es una de las mayores productoras de granos del país. El uso indiscriminado de plaguicidas es frecuente y los efectos producidos por éstos son muy graves para la salud. El glifosato es uno de los más ampliamente utilizados en nuestra región; éste es degradado en el suelo generando el subproducto AMPA, el que posee una toxicidad similar a la del glifosato (Mañas, 2009; Williams, 2000). Existen numerosas publicaciones que asocian la exposición prolongada a dosis subletales de estos plaguicidas con patologías como cáncer, malformaciones congénitas, afecciones neurotóxicas, trastornos inmunes, reducción de la fertilidad y abortos espontáneos, entre otros (Herbert, 2002; Young, 2001). Desarrollar un método de cuantificación para glifosato y AMPA, para analizar de manera sencilla muestras de alimentos de consumo diario: verduras frescas, frutas, entre otros. Desarrollar un método analítico sencillo, rápido, no contaminante del medio ambiente para la cuantificación de plaguicidas en alimentos, aplicando datos de segundo orden (matrices de excitación-emisión de fluorescencia) y calibración multivariada. Analizar la presencia de contaminantes en alimentos regionales, como verduras, frutas, ensaladas listas para consumir. En el presente trabajo se desarrolló un método más sencillo y más rápido que los descriptos en la bibliografía. Se cuantificó glifosato y AMPA simultáneamente, separándolos mediante métodos quimiométricos, sin recurrir a técnicas separativas. Ambos analitos fueron derivatizados con NBD-Cl a 90 °C durante 15 minutos en medio alcalino (buffer fosfato-borato pH 9) y metanol. Se enfría durante 5 minutos en un baño de hielo, se acidifica el medio con HCl y se lleva a volumen final con metanol, lo cual incrementa la señal de fluorescencia. Se prepararon dos juegos de calibración de cinco soluciones cada una, por duplicado, utilizando solución patrón de glifosato en un rango de 0 a 260 microgramos por litro y AMPA en un rango de 0 a 800 microgramos por litro, respectivamente; además se procesaron cuatro muestras artificiales, por duplicado, conteniendo ambos analitos. Las matrices de excitación-emisión de todas las soluciones se obtuvieron: excitando en un rango de longitudes de onda de 400 a 500 nm cada 10 nm, y se registró la emisión en un rango de 500 a 610 nm cada 10 nm. Al predecir las concentraciones de glifosato en las muestras artificiales aplicando PARAFAC se obtuvieron porcentajes de recuperación entre 91 y 126 %, y al aplicar MCR-ALS los porcentajes de recuperación resultaron entre 75 y 88 %. Al predecir las concentraciones de AMPA en las muestras artificiales aplicando MCR-ALS los porcentajes de recuperación resultaron entre 102 y 116 %, mientras que los resultados al aplicar PARAFAC se encontraron demasiado alejados del valor real. Se desarrolló un método fluorimétrico no separativo capaz de cuantificar simultáneamente Glifosato y AMPA. Los resultados de las predicciones son aceptables y el rango de concentraciones de trabajo obtenidos para este nuevo método es comparable con los límites aceptados por la comunidad europea y la FAO/OMS.