PERSONAL DE APOYO
MARIN VIEGAS Vanesa Soledad
congresos y reuniones científicas
Título:
Incremento en la acumulación de transglutaminasa tisular humana en células vegetales a través de la coexpresión con un anticuerpo simple cadena-fusionado a un polímero similar a elastina
Autor/es:
MARIN VIEGAS VANESA SOLEDAD; PETRUCCELLI, SILVANA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; XV Congreso Latinoamericano de Fisiología Vegetal; 2014
Resumen:
La transglutaminasa tisular humana
(htTG) es una proteína de interés para el diagnóstico de la enfermedad celíaca.
Resulta altamente tóxica en varios sistemas
de expresión por lo que se acumula en niveles bajos. A fin de sortear las
dificultades en la síntesis y recuperación, se evaluó la estrategia de
coexpresar htTG y un anticuerpo simple cadena (scFv-2G3) específico de htTG
fusionado a polímeros similares a elastina (ELP). La hipótesis planteada fue
que la interacción de scFv-ELP con htTG la protegería de la degradación. Para evaluarla,
se generó una fusión del scFv-2G3 a un ELP insoluble en las condiciones de
crecimiento de las plantas. Se efectuaron ensayos de expresión temporal en
hojas de Nicotiana benthamiana. El
efecto en la acumulación de htTG se evaluó por microscopía confocal e
inmunoblot. Al expresar RFP-htTG se observa la típica estructura del retículo
endoplásmico (ER) y se detecta una banda tenue por inmunoblot. Al expresar
RFP-ELP se observa la formación de cuerpos proteicos (PB) dentro del ER. Al coexpresar
RFP-htTG y scFv-ELP se observa htTG integrada a los PBs. Ensayos de inmunoblot
muestran que htTG se acumula en mayores niveles en presencia del scFv-ELP, confirmando
que esta estrategia podría utilizarse como método de estabilización.