Identificación de razas de Cladosporium fulvum amplificando AvrsIdentificación de razas de Cladosporium fulvum amplificando Avrs

LUCENTINI, CÉSAR GUSTAVO; MARIA INES TRONCOZO; FRANCO, MARIO EMILIO ERNESTO; LÓPEZ, SILVINA MARIANELA YANIL; MEDINA, ROCIO; SAPARRAT, MARIO CARLOS NAZARENO; BALATTI, PEDRO ALBERTO

Lima

Congreso; IX Congreso latinoamericano de Micologia; 2017

Asociación Latinoamericana de Micologia

Cladosporium fulvum (Mycosphaerellaceae; Capnodiales) es el agente causante del ?mohode la hoja de tomate?, una de las patologías que con más frecuencia ataca el cultivo detomate bajo cubierta en el cinturón hortícola platense (Argentina). En estudios previos sedeterminó que en las áreas de producción muestreadas de la Argentina sólo se encuentrandos razas del hongo, la raza ?0? y la ?2?, pero se encontraron polimorfimos a nivel de losgenes avr que son los que determinan las razas. Estos resultados sugieren la ocurrenciade procesos evolutivos o cambios genéticos por lo cual podrían originarse nuevas razas delhongo. Por ello el objetivo de este trabajo es conocer más profundamente la diversidad dede las poblaciones del patógeno que se encuentran en las áreas de cultivos hortícolas. Coneste fin se continuó realizando aislamientos del patógeno y, a partir de cultivos monospóricosdesarrollados en agar-papa-glucosado, se tomaron 300 mg del material para extraer ADNgenómico que fue utilizado en la reacción de Multiplex PCR. Esta consiste en amplificaren una reacción el avr 2 (570pb), avr 4 (806pb), avr4E (640pb); y avr 9 (710pb). La reacciónse realizó en un volumen de 15 μl programando la termocicladora de la siguiente manera:un tiempo de 5? a 94°C, seguido de 40 ciclos de tres pasos. Uno de desnaturalización de30? a 94°C seguido de una fase de annealing de 1? a 58,4°C y luego una fase de extensiónde 1? a 72°C, al final de los cuales se le adicionó un ciclo de extensión final de 7? a 72°C.La amplificación de los genes de avirulencia en primer lugar confirman que los aisladosson C. fulvum y que sobre un total de 15, 9 correspondieron a la raza 2 y el resto a la raza0. Si bien estos datos confirman resultados anteriores, aún resta estudiar los niveles depolimorfismos que presentan estos aislados a nivel de los avr.