Conservación de cultivos de bacterias y hongos de la colección del CIDEFI (FCAyF) mediante liofilización.

MEDINA, ROCIO; MARTINEZ-ALCANTARA, VIRGINIA; LUCENTINI, CÉSAR G.; REPARAZ, JUAN MANUEL; BALATTI, PEDRO A.

Hurlingham

Jornada; VII Jornadas Bonaerenses de Microbiologia de Suelos para una Agricultura Sustentable; 2022

INTA

El CIDEFI dispone de una cantidad de aislados de bacterias y hongos, algunosfitopatógenos y otros promotores del crecimiento o bicontroladores.El objetivo del trabajo es la conservación de una colección de organismos.Cultivos de Cladosporium fulvum y Stemphylium lycopersici desarrollados en medioAPG en tubos pico de flauta se resuspendieron en 5ml de Tween 80 (0.05%), sevortexearon y centrifugaron a 4.000 rpm, 15 minutos. Los pellets se lavaron 3 vecescon agua destilada estéril y resuspendieron en 10 % leche descremada y 1% deglicerol (lioprotector). El procedimiento se repitió con micelio desarrollado sobrecelofán. Los stocks de Pseudomonas fluorescens, Gluconacetobacter sp. y Rhizobiumsp. se cultivaron en agar nutritivo, LGI y YEM, respectivamente y con estos se iniciaroncultivos líquidos de 1 x10 8. cél.ml -1 , por centifugación a 13000 g, 20 min se obtuvieronpellets que se resuspendieron en el lioprotector.Las suspensiones de micelios esporas o bacterias se colocaron en bailes con soluciónlioprotectora a -80 °C por 24 hs y luego se liofilizaron por 24 hs. Los liofilizadosincubados una semana a 37 °C, se resuspendieron en 2 ml de medio de cultivo.La viabilidad bacteriana no fue afectada, pero la de los hongos se redujo. El aislado noesporulado de S. lycopersici se recuperó a partir de celofán y el esporulado semantuvo viable en las condiciones utilizadas, pero presentó cambios microscópicos ymacroscópicos.La liofilización mantuvo la viabilidad de las bacterias, si bien resta evaluar ciertascaracterísticas de cada aislado, pero afectó la morfología de los hongos recuperadosen el cultivo subsiguiente, por lo que se debe evaluar si el cambio es permanente.Disponer de un método de liofilización para bacterias y hongos, es clave para elmantenimiento de la colección del CIDEFI, de manera que los microorganismos esténdisponibles para los usos del centro y otros potenciales usuarios.