VARIANTES ALÉLICAS RHCE EN INDIVIDUOS CON FENOTIPO D DÉBIL TIPO 4

PRINCIPI, CINTIA; TRUCCO BOGGIONE, CAROLINA; MUFARREGE, NICOLÁS; LUJÁN BRAJOVICH, MELINA ELIANA; MATTALONI, STELLA MARIS; ENSINCK, MARÍA ALEJANDRA; GARCIA BORRAS, SILVIA; BIONDI, CLAUDIA; COTORRUELO, CARLOS

Buenos Aires

Congreso; XVII CONGRESO ARGENTINO DE MEDICINA TRANSFUSIONAL; 2019

Asociación Argentina de Hemoterapia e Inmunohematología

Fundamento: el sistema Rh es altamente polimórfico y presenta un gran interés clínicoen medicina transfusional debido a la participación de sus anticuerpos en los procesosde destrucción inmune de los glóbulos rojos. El locus RH está constituido por los geneshomólogos RHD y RHCE, dispuestos en tándem. Estos genes segregan como haplotiposy algunos alelos RHD y RHCE muestran desequilibrio de ligamiento genético. Se hanreportado más de 400 variantes alélicas que generan epitopes Rh parciales y/o débiles,fenotipos carentes de antígenos Rh de alta prevalencia y expresión de antígenos Rh debaja incidencia. La coexistencia de variantes alélicas aberrantes en cis en pacientes quese encuentran bajo terapia con transfusiones crónicas puede ser responsable de laproducción de aloanticuerpos complejos que conducen a reacciones hemolíticastransfusionales retardadas. Los estudios moleculares permiten la caracterización de losalelos involucrados en la expresión alterada de los antígenos Rh, resultando útiles paraoptimizar la compatibilidad transfusional. Objetivo: el objetivo de este trabajo fueestudiar la estructura molecular del alelo RHCE en individuos portadores de la variantealélica RHD*D débil tipo 4. Material y Métodos: se estudiaron 32 muestras portadorasdel alelo RHD*D débil tipo 4 previamente obtenidas de pacientes no relacionadosprovenientes de efectores de salud de diferentes provincias de nuestro país. Se investigóel fenotipo D por hemaglutinación con 4 reactivos monoclonales anti-D: IgM/IgG(clones TH28 / MS26), IgM (clon MS201), IgM (clon RUM1) e IgM (clones LDM1 yESD1M). También se estudió el fenotipo Rh completo con anticuerpos anti-C (cloneMS24), anti-c (clone MS33), anti-E (clon MS258/MS80) y anti-e (clones MS16 +MS21 + MS63). Se obtuvo ADN genómico a través de un método de salting-out. Seutilizó una técnica de PCR-SSP para detectar los polimorfismos c.733C y c.733G y unatécnica de PCR-RFLP para detectar los SNPs c.48C y c.48G en el gen RHCE.Resultados: todas las muestras analizadas mostraron una expresión débil del antígenoD y portaban sólo los antígenos c y e (fenotipo Rh completo: D débil tipo 4 ccee). Los estudiosde biología molecular permitieron identificar las siguiente variantes RHCE:RHCE*ce(733C/G, 48C/G) (n=30, 93,8%), RHCE*ce(733C/G, 48G/G) (n=1, 3,1%) yRHCE*ce(733G/G, 48C/C) (n=1, 3,1%) indicando la presencia de mutacionesresponsables de alteraciones en la expresión de antígenos codificados por el gen RHCE(c.733G y c.48C). Conclusiones: en todas las muestras portadoras de alelo RHD*Ddébil tipo 4 se detectaron variantes alélicas RHCE que generan antígenos ?c? y ?e?parciales, perdida de los antígenos de alta prevalencia ?hrB? y ?hrS? y presencia de losantígenos de baja prevalencia ?V? y ?VS?, lo que constituye una problemática a niveltransfusional para aquellos individuos portadores de estas variantes alélilcas enhomocigosis. La caracterización molecular del haplotipo RHD-RHCE en pacientesportadores del alelo RHD*D débil tipo 4 sería de utilidad para definir la compatibilidadtransfusional y evitar la posible formación de aloanticuerpos anti-D, anti-c o anti-e,principalmente en pacientes que tienen alelos RHCE*Ce, RHCE*cE o RHCE*ce(733G,48C) en trans y requieren terapia transfusional crónica para el tratamiento de supatología primaria.