Determinación de las frecuencias genotípicas y alélicas de los Sistema HPA-1, HPA-2 y HPA-3

MATTALONI, STELLA MARIS; MIGONI, ARIANA; TRUCCO BOGGIONE, CAROLINA; MUFARREGE, NICOLÁS; LUJÁN BRAJOVICH, MELINA ELIANA; ENSINCK, MARÍA ALEJANDRA; BIONDI, CLAUDIA; COTORRUELO, CARLOS

Congreso; XVI Congreso Argentino de Medicina Transfusional; 2017

Fundamento: los aloantígenos plaquetarios humanos (HPA) son porciones polimórficas de glicoproteínas de la membrana plaquetaria, capaces de generar una respuesta inmune en individuos susceptibles, al ser expuestos a estos antígenos durante embarazos, transfusiones sanguíneas o trasplantes. El interés de su estudio radica en su importancia diagnóstica y terapéutica en los cuadros clínicos asociados a la aloinmunización, como la Trombocitopenia Fetoneonatal Aloinmune (TFNA) y la Púrpura Postransfusional (PPT). La frecuencia de los aloantígenos plaquetarios y de los alelos que los codifican se han estudiado en diferentes poblaciones y se encontraron notables diferencias dependiendo del grupo étnico examinado.Objetivo: el objetivo de este trabajo fue investigar las frecuencias genotípicas y alélicas de los Sistemas HPA-1, HPA-2 y HPA-3 en dos grupos poblacionales diferentes.Materiales y Métodos: se estudiaron muestras de sangre periférica de 200 pacientes, 100 que concurrieron a un hospital público (HP) y 100 a una clínica privada (CP). Se obtuvo ADN genómico a través del método de salting-out. Se realizaron técnicas de PCR-RFLP para detectar los polimorfismos característicos de los antígenos HPA-1a / HPA-1b, HPA-2a / HPA-2b y HPA-3a / HPA-3b, utilizando cebadores complementarios a secuencias consenso que flanquean el nucleótido polimórfico y las endonucleasas de restricción MspI, BsaHI y FoxI. También se desarrollaron reacciones de PCR alelo específicas para detectar los genotipos HPA utilizando para el diseño de los oligonucleótido cebadores el programa informático Primer3 (http://bioinfo.ut.ee/primer3-0.4.0/primer3/). Estos ensayos fueron validados con controles internos.Resultados: para el Sistema HPA-1, las frecuencias genotípicas observadas en pacientes del HP fueron: 1a/1a=0.83, 1a/1b=0.17, 1b/1b=0.00 mientras que en pacientes de la CP fueron: 1a/1a=0.71, 1a/1b=0.28, 1b/1b=0.02. Las frecuencias alélicas observadas en el HP fueron: HPA-1a=0.92, HPA-1b=0.08 mientras que en la CP fueron: HPA-1a=0.84, HPA-1b=0.18. Para el Sistema HPA-2, las frecuencias genotípicas observadas en pacientes del HP fueron: 2a/2a=0.73, 2a/2b=0.26, 2b/2b=0.02 mientras que en pacientes de la CP fueron: 2a/2a=0.85, 2a/2b=0.13, 2b/2b=0.02. Las frecuencias alélicas observadas en el HP fueron: HPA-2a=0.86, HPA-2b=0.15 mientras que en la CP fueron: HPA-2a=0.91, HPA-2b=0.09. Para el Sistema HPA-3, las frecuencias genotípicas observadas en pacientes del HP fueron: 3a/3a=0.38, 3a/3b=0.47, 3b/3b=0.15 mientras que en pacientes de la CP fueron: 3a/3a=0.44, 3a/3b=0.53,3b/3b=0.03. Las frecuencias alélicas observadas en el HP fueron: HPA-3a=0.62, HPA-3b=0.38 mientras que en la CP fueron: HPA-3a=0.71, HPA-3b=0.30. Se encontraron diferencias significativas entre ambos grupos en la distribución genotípica (HPA-1: p