Discrepancia en la determinación del antígeno D en una muestra de sangre de cordón umbilical

LUJÁN BRAJOVICH, MELINA ELIANA; MUFARREGE, NICOLÁS; TRUCCO BOGGIONE, CAROLINA; MATTALONI, STELLA MARIS; GARCIA BORRAS, SILVIA; ENSINCK, MARÍA ALEJANDRA; BIONDI, CLAUDIA; COTORRUELO, CARLOS

Congreso; XVI Congreso Argentino de Medicina Transfusional; 2017

Introducción: El sistema Rh de grupo sanguíneo es altamente polimórfico y uno de los más importante en medicina transfusional y obstétrica. Numerosos alelos RHD son responsables de un fenotipo D variante, caracterizado por una intensidad de aglutinación inferior a la observada en el fenotipo D positivo. Presentación del caso: Una muestra de sangre de cordón umbilical fue remitida al laboratorio de Inmunohematología para realizar las pruebas de rutina: tipificación de grupos sanguíneos ABO y Rh y prueba de Coombs directa. En una primera etapa, la muestra fue estudiada en una tarjeta DG Gel® ABO/Rh (2D) determinándose el grupo sanguíneo A y observándose un resultado positivo (2+) en las columnas correspondientes a D y D?. La prueba de Coombs directa resultó negativa. A continuación se analizó la muestra en una tarjeta DG Gel® Rh Pheno+ Kell y se observó una aglutinación de dos cruces (2+) en las columnas correspondientes a las determinaciones DVI+ y C y de 4 cruces (4+) en las columnas correspondientes a las determinaciones c y e. Posteriormente se analizó el antígeno D por la técnica de aglutinación en tubo obteniéndose un resultado negativo en la lectura inmediata y post incubación a 37ºC. En la prueba de la antiglobulina indirecta se observó un aglutinado semicuantificado con un valor de +/-. Debido a las discrepancias obtenidas en la tipificación del antígeno D, se complementaron los estudios con técnicas de biología molecular. Se investigó la presencia de fragmentos RHD específicos (intrón 4 y 3?UTR) en la muestra de ADN obtenida mediante una estrategia de PCR multiplex, identificándose secuencias génicas, y se estudiaron las principales variantes alélicas responsables de un fenotipo D variante reportadas para nuestra población. Los estudios moleculares no permitieron identificar alelos D variantes responsables de una expresión alterada del antígeno D. Se citó a la madre y al recién nacido (RN) al laboratorio de Inmunohematología para tomar muestras de sangre periférica. Los estudios serológicos mostraron que el fenotipo Rh completo del RN era dccee, mientras que el fenotipo materno DCcee. Estudios moleculares realizados para la detección de fragmentos RHD específicos en la muestra de ADN obtenida a partir de sangre del RN, revelaron un genotipo RHD negativo. Conclusiones: La expresión débil de los antígenos D y C observada en la muestra de sangre de cordón umbilical podría atribuirse a la presencia de sangre materna. Destacamos la importancia de estudiar en profundidad las expresiones débiles del antígeno D para no incurrir en resultados falsos positivos.