ESTUDIO DE LAS BASES GENÉTICAS RESPONSABLES DE UNA DISCREPANCIA ABO

LUJÁN BRAJOVICH, MELINA ELIANA; TRUCCO BOGGIONE, CAROLINA; MUFARREGE, NICOLÁS; MATTALONI, STELLA MARIS; ENSINCK, MARÍA ALEJANDRA; BIONDI, CLAUDIA; COTORRUELO, CARLOS

Congreso; XIX Congreso y XXXVII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2017

El sistema ABO es el grupo sanguíneo más importante en medicina transfusional. Este sistema consta de cuatro fenotipos más comunes: A, B, O y AB, los cuales están determinados por la presencia o ausencia de los antígenos A y B en la membrana de los glóbulos rojos (GRs). También se caracteriza por la presencia de anticuerpos naturales (isohemaglutininas) dirigidos hacia los antígenos A y/o B ausentes. La expresión débil de los antígenos del sistema ABO puede resultar de la herencia de variantes débiles, como por ejemplo los fenotipos A2, A3, Ax, Ael, B3 y Bx, o estar asociada a ciertas enfermedades. El objetivo de este estudio de caso fue identificar las bases moleculares responsables de una discrepancia en la tipificación serológica del sistema ABO en un donante de sangre. Se estudió una muestra de sangre remitida al laboratorio de Inmunohematología para confirmar el grupo sanguíneo. Se investigó la presencia de los antígenos A y B (prueba directa) utilizando reactivos monoclonales IgM anti-A (clon BIRMA-1), anti-B (clon LB-2) y anti-AB (clones BIRMA-1/ES-4/ES-15). El estudio de los anticuerpos naturales (prueba inversa) se realizó utilizando suspensiones de GRs de fenotipo conocido (A1, B y O). La prueba directa evidenció un resultado positivo en los tubos ensayados con los reactivos anti-A, anti-B y anti-AB. En el estudio de las isohemaglutininas por prueba inversa en tubo se observó un resultado positivo en el ensayo con GRs A1. Se registraron resultados negativos en los tubos ensayados con eritrocitos B y O. Debido a la discrepancia entre la prueba directa e inversa con las cuáles se detectó la presencia del antígeno A y de anticuerpos naturales anti-A respectivamente, se utilizó una estrategia de biología molecular basada en PCR SSP para definir el genotipo ABO del donante. En una muestra de ADN obtenida por el método de salting-out se investigaron sustituciones nucleotídicas relacionadas a los alelos A1, A2, B, O1 y O2. Estos estudios permitieron identificar el cambio nucleotídico 803G>C, característico de la glicosiltransferasa B y la deleción 1059, responsable del fenotipo A2. Los resultados obtenidos indicaron que el donante tiene el grupo sanguíneo A2B con isohemaglutininas anti-A1. Debido a las consecuencias clínicas fatales asociadas con las incompatibilidades ABO, la caracterización molecular resulta de fundamental importancia en la evaluación pre-transfusional y en la tipificación antes de un trasplante, en los casos donde se presentan discrepancias entre las pruebas eritrocitarias y serológicas.