Identificación de alelos RHD responsables de fenotipos D variantes

LUJÁN BRAJOVICH, MELINA ELIANA; TRUCCO BOGGIONE, CAROLINA; LARROQUE, CECILIA; RACCA, LILIANA; RACCA, AMELIA; COTORRUELO, CARLOS

Rosario, Santa Fe

Congreso; VI Congreso, 10º Encuentro Bioquímico. Rosario; 2011

Numerosos alelos RHD son responsables de expresiones alteradas del antígeno D. Actualmente se considera que pacientes con una expresión disminuida de los epitopes D pueden desarrollar una respuesta inmune luego transfusiones con unidades RhD+. Sin embargo, se ha demostrado que receptores con variantes D débiles tipo 1, 2 y 3 no producen anticuerpos anti-D. El objetivo de este trabajo fue caracterizar las variantes alélicas del gen RHD que generan una expresión débil del antígeno D en individuos de Rosario. Se estudiaron muestras de pacientes del Hospital Provincial del Centenario (G1, n=45) y de un laboratorio privado (G2, n=43) que aglutinaron débilmente en placa con el reactivo anti-D (intensidad de reacción entre +/- y +++) o que resultaron RhD+ en la fase antiglobulina indirecta. Se determinó el fenotipo Rh completo por técnicas de hemaglutinación. Se caracterizaron por PCR SSP, exón scanning, microarray o secuenciación las variantes alélicas del gen RHD. Los estudios moleculares permitieron identificar 21 muestras portadoras del alelo D débil tipo 1 (G1: n=11, 24,44%; G2: n=10, 23,26%), 9 D débil tipo 2 (G1: n=6, 13,33%; G2: n=3, 6,98%), 8 D débil tipo 3 (G1: n=4, 8,89%; G2: n=4, 9,30%), 11 D débil tipo 4.0 (G1: n=2, 4,44%; G2: n=9, 20,93%) y 4 (8,89%) muestras D débil tipo 4.2 solo presentes en G1. Se hallaron también 22 muestras DVII (G1: n=10, 22,22%; G2: n=12, 27,91%), 2 D débil tipo 59 (G1: n=1, 2,22% y G2: n=1, 2,33%). Se identificaron 4 (2,22%) muestras portadoras de alelos DIVa, DVa, DAU-4 y DOL respectivamente en G1. No se observaron modificaciones en las secuencias codificantes de 7 muestras (G1: n=3, 6,67%; G2: n=4, 9,30%). Estos hallazgos indican que los alelos D débiles tipo 1, 2 y 3 representan el 43,18% de las muestras con expresión disminuida del antígeno D. Las variantes D débil tipo 4.2, DIVa, DAU-4 y DOL fueron sólo encontradas en G1; mientras que el D débil tipo 4.0 fue más frecuente en G2. La genotipificación RHD permitirá optimizar el uso de las escasas unidades RhD- disponibles en los Bancos de Sangre y racionalizar la administración de la inmunoprofilaxis con anti-D en embarazadas RhD-.