Estudio molecular de las expresiones débiles del antígeno D

LUJÁN BRAJOVICH, MELINA; TRUCCO BOGGIONE, CAROLINA; BIONDI, CLAUDIA; GARCÍA BORRÁS, SILVIA; RACCA, AMELIA; COTORRUELO, CARLOS

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LVII Reunión científica. Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología

La expresión del antígeno D del sistema Rh en los glóbulos rojos (GR) presenta variaciones cuantitativas en algunos individuos. Actualmente en los Bancos de Sangre, se considera que los pacientes con expresión disminuída de los epitopes D, desarrollan una respuesta inmunológica luego de la transfusión de GR RhD positivos. Estudios recientes han demostrado que los receptores con variantes D débiles tipo 1, 2 y 3, no producen anticuerpos anti-D. El objetivo de este trabajo fue identificar expresiones débiles del antígeno D y genotipificar sus alelos. Se estudiaron 12672 muestras de dadores voluntarios del servicio de Hemoterapia del Hospital Provincial del Centenario. Se utilizaron 2 anticuerpos monoclonales anti-D para identificar los individuos RhD positivos, RhD negativos y fenotipos con variantes D débiles, por hemaglutinación. Se determinó el fenotipo Rh completo con anticuerpos monoclonales específicos anti-C, anti-c, anti-E y anti-e en las muestras que presentaron aglutinación débil en medio salino (AD) y en las que solo reaccionaron con la prueba de la antiglobulina indirecta (PAI). Se obtuvo ADN por la técnica de salting out y se estudiaron por PCR-SSP cuatro SNPs responsables de alelos D débiles. Se identificaron por métodos serológicos 39 muestras con AD y los estudios moleculares permitieron caracterizar los siguientes alelos D débiles: 5 tipo 1, 4 tipo 2, 1 tipo 3 y 3 tipo 4. En 22 muestras con PAI positiva se genotipificaron los siguientes alelos débiles: 13 tipo 1, 3 tipo 2, 1 tipo 3 y 3 tipo 4. No se observó una correlación entre el fenotipo Rh completo y el tipo de D débil hallado. Estos hallazgos indican que las técnicas serológicas no determinan con precisión las distintas variantes débiles. Hemos observado que el mismo alelo D débil puede presentar una expresión fenotípica diferente en distintos individuos. La caracterización molecular de estos alelos constituye una herramienta útil para la selección de unidades compatibles en los Bancos de Sangre.